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家蠶Prosβ1基因在蛾翅及早期發(fā)育中的作用
關鍵詞：家蠶 翅 發(fā)育 蛋白酶體
摘要：家蠶是鱗翅目的代表物種,研究其翅發(fā)育相關基因有助于理解影響昆蟲翅發(fā)育的內在因素,為鱗翅目害蟲的遺傳防治提供理論基礎和靶標。家蠶的蛋白酶體β亞基1(Bombyx mori proteasome subunitβtype-1,BmProsβ1)是家蠶蛋白酶體核心顆粒的組件之一,負責水解折疊錯誤或細胞不需要的蛋白質,在細胞發(fā)育和器官形成過程中發(fā)揮重要作用。利用RNAi干擾技術,在家蠶體腔翅原基附近注射體外合成的針對BmProsβ1基因的小RNA,qRT-PCR檢測試驗組翅原基中BmProsβ1的表達水平得到有效抑制;對干擾后翅表型的統(tǒng)計結果顯示,試驗組中小翅個體的比率占52.38%,而對照組中未出現小翅個體。表明在BmProsβ1表達受到抑制的情況下,會嚴重影響家蠶翅的發(fā)育。進一步利用CRISPR/Cas9技術對BmProsβ1進行基因敲除實驗,結果顯示注射sgRNA與Cas9 mRNA的蠶卵孵化率極低并在幼蟲期死亡,而對照組孵化率達到37.92%。這表明BmProsβ1基因在家蠶的早期發(fā)育過程中也起到重要作用,其功能缺失會導致家蠶胚胎和幼蠶致死。
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