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表達H9亞型禽流感病毒HA蛋白的重組耐熱新城疫病毒株的雞胚傳代研究

唐國毅; 商雨; 李林濤; 任助; 李麗; 王紅琳; 羅青平; 曾馳; 溫國元 武漢輕工大學生物與制藥工程學院; 湖北武漢430023; 農業部畜禽細菌病防治制劑創制重點實驗室; 湖北武漢430064; 湖北省農業科學院畜牧獸醫研究所; 湖北武漢430064

關鍵詞:新城疫 重組病毒 耐熱選育 雞胚傳代 

摘要:新城疫和禽流感嚴重危害世界養禽業,對其防控在我國主要依賴疫苗接種。課題組前期獲得了一株可表達H9亞型禽流感病毒HA蛋白的重組耐熱新城疫病毒rTS-HA株。進一步對其雞胚傳代特性進行研究,旨在分析重組新城疫病毒在傳代過程中的熱穩定性和外源基因表達穩定性。將其在SPF雞胚傳至18代,每隔4代耐熱選育1次,取中間代次毒株,測定其增殖效價、雞胚最小致死劑量的平均死亡時間(mean death time,MDT),同時設置未耐熱選育的對照。結果表明,通過耐熱選育將rTS-HA株傳至第18代后,其增殖滴度未發現顯著變化,MDT均大于120 h,表明毒力無返強現象,但其耐熱性有顯著提升,而未進行耐熱選育的雞胚傳代株的耐熱特性顯著下降。動物試驗結果表明,耐熱選育后毒株的免疫效果較初代毒株也有明顯的提升。以上結果表明重組新城疫病毒rTS-HA株需要進行耐熱選育傳代,才能保持其耐熱特性,同時其免疫原性也有一定的提升,可作為新城疫和禽流感二聯耐熱基因工程活疫苗的候選毒株。

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