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種間雜交選育新型產(chǎn)脂蛹蟲草
關(guān)鍵詞：蛹蟲草 深黃被孢霉 雜交 原生質(zhì)體融合
摘要：為選育能夠合成蟲草素又能高效積累油脂的新型蛹蟲草菌株,將高產(chǎn)蟲草素的蛹蟲草FY1421及高效合成油脂特別是不飽和脂肪酸的深黃被孢霉菌株Z0108進(jìn)行原生質(zhì)體融合。對親本的原生質(zhì)體的形成與再生、雙親滅活及融合的條件進(jìn)行了篩選與優(yōu)化,并結(jié)合96微孔板初篩和搖瓶發(fā)酵復(fù)篩,獲取融合子。結(jié)果表明:蛹蟲草菌株FY1421采用1.5%溶壁酶+0.5%蝸牛酶+0.5%纖維素酶的混合酶液處理120 min,原生質(zhì)體數(shù)量最多,再生率最高;深黃被孢霉菌株Z0108采用1%溶壁酶+1%蝸牛酶+1%纖維素酶的混合酶液處理4 h,原生質(zhì)體數(shù)量最多,再生率最高;FY1421原生質(zhì)體采用60℃水浴熱滅活10 min,Z0108原生質(zhì)體采用紫外線滅活30 s,均可達(dá)到100%的滅活率;滅活雙親在35℃下,使用40%的PEG促融10 min,融合效率最高。從650株融合子篩選得到融合菌株RCS262,其搖瓶發(fā)酵蟲草素含量達(dá)5926μg·g^-1,油脂含量達(dá)到37.5%。采用原生質(zhì)體融合技術(shù)進(jìn)行蛹蟲草與深黃被孢霉的種間雜交,成功獲得融合菌株既能高產(chǎn)蟲草素,也具有高效積累油脂的能力。
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