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伽馬射線輻射結合亞硝基胍誘變選育他克莫司高產菌株
嚴凌斌; 張文州; 張祝蘭; 張引; 邱觀榮; 王德森; 連云陽 福建省微生物研究所福建省新藥(微生物)篩選重點實驗室; 福州350007; 泉州醫學高等專科學校; 泉州362100
關鍵詞：鏈霉菌 他克莫司 發酵 輻射誘變 亞硝基胍
摘要：為了選育穩定高產的他克莫司菌株,提高發酵水平,對他克莫司出發菌株采用450 Gy劑量的^60Co γ輻射誘變及3 mg/mL亞硝基胍(NTG)處理30 min誘變,并分別結合鏈霉素和慶大霉素進行抗性篩選.經選育獲得一株高產、遺傳穩定的他克莫司突變株FIM-17-17,該菌株的搖瓶發酵水平較出發菌株提高了65%.考察該突變株的穩定性,及樹脂AB-8、D101、HT60、XAD16、HP20和XDA-8對發酵水平的影響,并在容量1 t的發酵罐進行中試發酵驗證.結果表明,突變株FIM-17-17遺傳穩定,且在發酵培養基中添加2%的D101樹脂后,發酵水平又提高了29.8%,發酵罐中試發酵水平平均達1 319 μg/mL.結果提示,利用^60Co γ射線輻射和NTG復合誘變能有效獲得他克莫司高產菌株.
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