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基于RNAi和蛋白質(zhì)組學(xué)研究膠孢炭疽菌CgCDC2基因的功能
關(guān)鍵詞：杧果 膠孢炭疽菌 cdc2 rnai tmt蛋白質(zhì)組學(xué)
摘要：【目的】CDC2是調(diào)控細(xì)胞周期的主要因子之一,對植物病原菌的生長發(fā)育有著重要作用,但目前還未有膠孢炭疽菌CDC2蛋白生物學(xué)功能方面的研究。本試驗的目的是獲得膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)CgCDC2的RNAi突變體菌株,并分析CgCDC2基因的功能。【方法】利用RNAi技術(shù)和PEG介導(dǎo)法獲得CgCDC2的RNAi突變體菌株,通過表型分析、TMT蛋白質(zhì)組學(xué)分析和酶活性測定來確定該基因的生物學(xué)功能。【結(jié)果】通過PCR擴(kuò)增獲得CgCDC2基因,編碼一個326個氨基酸的蛋白,其RNAi突變體菌株與野生型相比,生長速率減緩、分生孢子產(chǎn)量顯著下降、對H2O2敏感性增強(qiáng),PG、PL蛋白質(zhì)含量、基因相對表達(dá)量和酶活性均顯著降低,致病力減弱。【結(jié)論】CgCDC2參與調(diào)控膠孢炭疽菌的生長,分生孢子產(chǎn)量,氧化應(yīng)激反應(yīng)以及PG、PL的酶活性,從而降低病原菌的致病力。
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