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細胞技術論文模板(10篇)

時間:2023-03-16 17:34:46

導言:作為寫作愛好者,不可錯過為您精心挑選的10篇細胞技術論文,它們將為您的寫作提供全新的視角,我們衷心期待您的閱讀,并希望這些內容能為您提供靈感和參考。

細胞技術論文

篇1

2、儀器:美國SurPathTMPrepstain全自動液基薄層細胞制片染片機(BDTriPath,BurlingtonNC,USA)及相關耗材。采用奧林巴斯電子支氣管鏡(BF-260或1T260工作鏡)進行檢查。鏡下發現肺癌的直接征象或間接征象者,根據胸部CT提示的病變行透視下支氣管鏡肺活檢。所有患者均在活檢部位采用南京微創一次性保護型細胞刷刷檢,將毛刷頭直接在玻片上常規涂片1張。再將毛刷頭置于盛有10mlCyteRichRed固定液的50ml離心管中充分震蕩漂洗收集細胞。

3、制片方法

3.1傳統涂片方法:纖維支氣管鏡刷頭直接涂抹于載玻片上,涂片1張,干燥,95%乙醇固定10min,常規HE染色鏡檢。

3.2BDTriPath制片方法:標本加入專用50ml離心管中,使用程控離心機以Hettich3#程序600r/min離心10min,迅速管架倒置180°傾出上清液,加入CyteRichRed固定液20ml,靜置30min,Hettich的3#程序以600r/min離心10min,迅速管架倒置180°傾出上清液,渦漩混合器振蕩均勻,加入10mlTris緩沖液,混均,移至12ml的離心管,Hettich的4#程序以600r/min離心5min,迅速管架倒置180°傾出上清液,渦漩混合器振蕩(15±5)s。管架放在PrePStain系統上,靜置10min,等待上機自動制片染色。

4、判斷標準:涂片診斷采用正常、可疑癌細胞、癌細胞三種分類方法,后兩項為陽性標本。盡量由同一位醫師操作電子支氣管鏡采集標本,由兩位細胞病理學醫師同時閱片鏡檢,以找到癌細胞為陽性。

5、統計學方法:統計學處理數據采用SPSS10.0軟件包進行χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

二、結果

兩種涂片質量比較:傳統涂片,涂片范圍大小不一,涂片背景紅細胞白細胞多,細胞分布厚薄不均,胞質核漿結構對比不明顯,胞核染色質均一模糊、核仁不清;支氣管鏡刷檢細胞標本LCT制片后,細胞集中于涂片范圍直徑15mm專用玻片上,細胞界限清楚,涂片背景干凈清晰,細胞分布單個散在或成團分布,有立體感,胞質著色鮮艷、易于觀察,胞核核膜分明,核內染色質及核仁清晰可見。薄層液基細胞學涂片診斷肺癌陽性率為58.33%,(146/252),其中中央型肺癌98例,周圍型肺癌48例。傳統涂片診斷肺癌的陽率為33.19%,(84/252),其中中央型肺癌68例,周圍型肺癌16例。液基薄層細胞學與傳統涂片的陽性率的差異有統計學意義P<0.05。

三、討論

支氣管鏡刷檢細胞學標本應用傳統涂片方法制片,受細胞新鮮程度、細胞量、出血及炎性背景、制片技術等因素影響,造成背景不清晰、涂片細胞易重疊、厚薄不均、細胞形態不易觀察、有意義細胞數量偏少,容易出現假陰性或假陽性結果,漏診重要病變。液基薄層細胞學制片技術(LCT)是近年來出現一種制片技術的革新,明顯優于傳統巴氏涂片的檢查方法,其中有代表性的是BDThiPth離心沉降技術和新柏氏(ThiPthTCT)模式技術。兩種方法工作原理不同,分別為重力沉降式和過濾膜式,已經廣泛成熟應用于宮頸細胞學檢查和TBS診斷報告,對比傳統巴氏涂片,宮頸癌及癌前病變(低度鱗狀上皮內病變和高度鱗狀上皮內病變)檢出率大大提高,標本采集及制片質量的優越性是傳統涂片技術無法比擬的,特別是BDThiPth制片技術在細胞數量、背景去除非診斷性雜質、全自動制片染色及診斷質量尤為突出。美國FDA認證:超柏式液基薄層細胞學檢查是所有液基細胞學技術中檢出率最高的技術。2005年美國病理協會非婦科細胞學實驗室比較液基制片方法與傳統制片方法在體液樣本檢測能力,證實液基制片方法更容易檢出腫瘤。

對比傳統涂片,LCT制片使細胞在載玻片上分布均勻,厚薄一致,細胞數量多,集中于15mm范圍內易于閱片,核染色質著色鮮明,核漿對比效果好,易于觀察核結構,染色背景清晰,制片質量十分滿意,陽性率顯著提高。LCT制片技術和診斷質量體會:支氣管鏡刷檢由于全部收集或大部分收集送檢標本,最大程度保留病變細胞,尤為適用LCT制片方法;液基涂片中的細胞核可能不如傳統涂片中那樣深染,但細胞核異型性是判讀惡性或可疑惡性病變的重要重要標準,一般認為核占優勢、核漿比例高、核膜不規則、染色質凝塊狀、核仁清或多個小核仁為惡性證據;巴氏染色胞漿在區分腺癌或分化鱗癌很有幫助,前者胞漿見空泡,后者胞漿橘黃色、含角蛋白;仔細觀察成團核深染的細胞,如懷疑異常,在背景中全面尋找單個異型細胞更有意義;提高制片質量顯著,但診斷陽性率的改善還需病理診斷醫師勤于積累,LCT在支氣管鏡刷檢細胞標本應用時間及應用范圍還比較晚,對同一份標本同時進行普通涂片,以積累經驗,減少誤診。

支氣管鏡檢查是目前診斷肺癌的常規檢查方法,刷檢聯合組織活檢的重要手段。傳統支氣管鏡黏膜細胞學檢查是在支氣管鏡檢查過程中用支氣管毛刷直接在普通玻片上涂片,診斷率低。LCT對肺癌有更高的診斷率。國內也有少量文獻報道。本研究結果顯示,經過與組織病理學對照,普通涂片法檢出敏感度為33.19%,而LCT檢出敏感度為58.33%,較普通涂片法提高了25.14%,差異有統計學意義(P<0.05)。

篇2

1.1宿主細胞來源Yamanaka將小鼠體細胞誘導為iPSC開啟了該技術的先河,之后人、大鼠、猴、豬、綿羊,甚至一些瀕危動物的iPSC系紛紛建立。就人類而言,目前已從皮膚成纖維細胞、角質成形細胞、羊水、神經前體細胞、外周血細胞,甚至尿液中獲得iPSC。不同組織來源細胞重編程效率及所需因子不同。不僅iPSC分化能力因人而異,在表觀遺傳穩定性和癌基因的表達方面也存在男女有別現象。使得iPSC技術應用于臨床個體治療更具挑戰性。

1.2重組因子的選擇及導入方式經典的Yamanaka因子在癌細胞中存在超表達、整合型載體可導致插入突變,且誘導效率非常低。因此,iPSC研究者一直致力于尋求更安全、簡單、有效的誘導策略。Anokye-Danso等應用微RNA調控技術,不使用轉錄因子高效誘導iPSC。Zhou等和Kim等分別利用Yamanaka四因子的融合蛋白和穿膜肽與轉錄因子蛋白的融合蛋白,直接誘導受體細胞為iPSC,但效率較低。一些學者利用腺病毒、質粒載體瞬時轉染靶細胞,或利用Cre/LoxP系統、oriP/EBNAI系統及piggyBac轉座系統將外源基因整合后再特異性切除,從而得到不含外源基因整合的iPSC,但是存在基因重排及效率低下現象。而一些小分子化合物(如丙戊酸、曲古抑菌素A、維生素C、篩選激酶抑制劑、BIX-01294、5-AZA、Wnt3a、Zscan4因子)的應用可顯著提高iPSC的產生效率。

1.3iPSC的誘導分化Zhao等利用iPSC通過四倍體囊胚注射得到存活并具繁殖能力的小鼠,證明了iPSC的全能性。目前,人們已成功地將iPSC在體外定向誘導分化為神經細胞、造血細胞、胰腺細胞、肝細胞、血管內皮細胞、心肌細胞、平滑肌細胞、耳蝸毛細胞、色素細胞等類型細胞。

1.4iPSC機制相關研究突破研究人員長期受困于體細胞重編程的具體機制。Polo等繪制出體細胞重編程為iPSC的分子線路圖,證實誘導過程引起了兩次轉錄波,分別是由c-myc/Klf4和Oct4/Sox2/Klf4驅動,并確定了重編程過程中路障基因?;趇PSC技術已證明細胞的分化過程并非不可逆轉,研究人員利用細胞直接重編程技術將已分化細胞直接轉化成特定譜系的細胞,利用間接譜系轉化技術部分去分化生成多潛能祖細胞,為干細胞研究開辟了新思路。

2臨床應用前景

iPSC因其分化全能性、體外易擴增、易于基因干擾或過表達等特性,在再生醫學、藥物研發評價、組織工程等領域有廣泛應用前景。

2.1疾病特異iPSC動物疾病模型由于種屬差異,不能真實反映人類疾病,利用疾病特異的iPSC系建立的iPSC疾病模型則可彌補這一缺陷,還可在免疫缺陷動物體內觀察疾病。當前已建立包括神經系統疾病(帕金森病、亨廷頓病、肌萎縮側索硬化癥、脊髓性肌萎縮、唐氏綜合征、脆性X綜合征),血液系統疾病(范科尼貧血、鐮刀細胞型貧血、β地中海貧血、原發性骨髓纖維化),代謝系統疾病(1型糖尿病,Ⅲ型戈謝病,Shwachman-Bodian-Diamond綜合征、肌營養不良、萊施-奈恩綜合征)及其他疾病(右心室心肌病)等特異的iPSC系。

2.2藥物研發及篩選大規模藥物篩選需要很多細胞,iPSC可以無限增殖,并且疾病特異iPSC本身就是篩選藥物的目標。Takayama等導入Foxa2及肝細胞核因子1α到人類ESC/iPSC產生具有代謝功能的肝細胞樣細胞,對篩查藥物肝毒性具有重大意義。Lippmann等將iPSC轉化為血腦屏障的內皮細胞,可用于神經系統疾病藥物高通量篩選或藥物神經毒性檢測。Egawa等利用肌萎縮側索硬化癥患者iPSC分化而來的神經細胞來篩選并確認藥物效果,發現漆樹酸具有改善神經異常的作用。

2.3組織工程學應用用干細胞培養的人體組織是理想的器官再造來源。英國已經報道利用3D打印技術為癌癥患者重塑面部,Faulkner-Jones等將3D打印拓展到人ESC范圍,當3D打印技術能夠兼容iPSC時,組織工程學將邁上一個新的臺階。

2.4臨床疾病治療

2.4.1神經系統疾病帕金森病是一種常見的神經退行性疾病,目前治療手段只能改善癥狀。Kikuchi等利用iPSC分化出能產生多巴胺的神經細胞,然后移植到帕金森病猴子腦部,這些細胞存活半年以上,并持續釋放多巴胺,很大程度上減輕了患病猴子的癥狀。Jiang等將帕金森病患者和健康志愿者皮膚細胞來源iPSC誘導為腦細胞并對比,觀察到parkin基因發生突變產生自由基破壞多巴胺神經元是帕金森病發病機制之一。除帕金森病外,在阿爾茨海默病、脊髓側索硬化癥、脊髓肌肉萎縮癥及舞蹈癥等神經退行性疾病研究中,iPSC也取得許多進展。

2.4.2血液系統疾病Hanna等將人類鐮刀型貧血癥小鼠皮膚成纖維細胞建立的iPSC,通過同源重組技術獲得正?;蛐蚷PSC,誘導為造血干細胞并移植后可治療動物模型的鐮狀細胞性貧血。Xu等用iPSC來源的內皮前體細胞和內皮細胞移植到血友病小鼠肝臟中,病鼠出血癥狀得到了改善。Raya等獲得了基因修飾后的貧血癥患者特異性iPSC,其能夠分化成表型正常的髓系和紅系造血祖細胞。最近,日本學者利用iPSC培養出一種能產生促紅細胞生成素的細胞,有望用于治療腎性貧血。

2.4.3心血管系統疾病2008年,Schenke-Layland等成功地將小鼠iPSC在體內和體外分別誘導出了心肌細胞。之后,Nelson等將iPSC分化得到的心肌細胞移植入具有完整免疫系統的成年小鼠梗死心臟內,能夠觀察到功能性的新生心肌。Tohyama等使用不含葡萄糖的低成本培養液獲得大量純度高達99%的心肌細胞,且幾乎不存在癌化風險。而Zhang等證實iPSC具有分化為心房、心室和竇房結細胞等的潛能。

2.4.4感官疾病感音神經性聾的主要原因是毛細胞及螺旋神經節細胞退變和死亡,而其治愈需要相關結構的修復或再生。Nishimura等將iPSC來源神經祖細胞移植到小鼠耳內,觀察到這些神經細胞開始表達谷氨酸神經元的標志性因子,表明iPSC可用于螺旋神經節損傷的再生修復。Oshima等使用小鼠ESC及iPSC成功分化出了功能性內耳毛細胞。Mizutari等使用γ-分泌物抑制劑抑制Notch信號通路,刺激支持細胞轉變為毛細胞,首次證明成熟哺乳動物的感音毛細胞也能再生。感音毛細胞的損傷導致聽力損失,感光細胞的損失則導致視力損失。Meyer等將iPSC分化為視網膜色素上皮細胞,成功治愈1例回旋狀脈絡膜視網膜萎縮癥患者。Singh等將發育中的感光細胞移植到盲鼠眼睛中,能夠再次形成視網膜的整個光敏感層,恢復視覺。

2.4.5內分泌系統疾病Tateishi等將正常人iPSC培養成胰島素分泌型的胰島細胞,其不僅能分泌C肽和胰高血糖素,而且能通過感受葡萄糖的刺激來調節C肽的分泌。Maehr等用1型糖尿病患者的成纖維細胞來源iPSC分化出了具有胰島素分泌功能的細胞。這些研究使糖尿病患者特異細胞治療成為可能。

2.4.6生殖系統疾病Park等將iPSC體外分化并分離得到原始生殖細胞,其與體內分離的原始生殖細胞在基因表達上極相似。Hayashi等將小鼠ESC和iPSC在體外誘導成為原始生殖細胞樣細胞并分化為功能正常的和卵子。如果能進一步將人原始生殖細胞體外分化為和卵子,就有望治療不孕不育癥。

2.4.7運動系統疾病杜氏肌營養不良是一種X染色體隱性遺傳病,患者早期即出現肌肉無力或萎縮,嚴重威脅生命安全。Filareto等將杜氏肌營養不良小鼠皮膚細胞重編程為了iPSC,進行遺傳修復,再分化成骨骼肌干細胞進行移植治療,能產生功能性肌肉,并檢查到新形成的肌纖維表達修復后的標記,證明了iPSC技術結合遺傳修復技術治療杜氏肌營養不良的可行性。Diekman等利用iPSC在小鼠實驗中培育出無再生能力的軟骨,有望成為人造軟骨組織的來源。

2.4.8腫瘤Chen等用小鼠iPSC培育出了癌癥干細胞,并確認其發展成癌細胞的過程。Yang等發現人類iPSC來源的神經干細胞可以靶向腫瘤,或可用于聯合基因治療,抑制腫瘤生長。Vizcardo等從惡性黑色素瘤患者體內提取出T淋巴細胞,誘導出iPSC再分化成為T淋巴細胞,發現這些T細胞能夠識別黑色素瘤特異性蛋白黑色素瘤抗原1,繼續攻擊癌細胞。此方法能夠大量培養T淋巴細胞,有望在此基礎上開發出治療癌癥的新型免疫療法。

2.4.9其他人類疾病CCR5(C-Cchemokinereceptortype5)是人類免疫缺陷病毒進入靶細胞的重要輔助受體,缺乏CCR5使人類免疫缺陷病毒不能感染人體。Yao等用鋅指核酸酶技術剔除患者iPSC的CCR5基因,并誘導成造血干細胞,為艾滋病的治療提供一條新的可能途徑。Arakaki等將小鼠iPSC與小鼠齒源性上皮細胞共培養,轉化為成釉細胞,且含有作為牙釉質成分的成釉蛋白,這對牙齒再生和修復研究至關重要。

篇3

1.化學因子(1)酸和堿:酸能水解生物大分子或催化其水解。過氧乙酸是一種常見的抗感染因子,對殘留的核酸具有很強的去除作用,而對ECM的影響較??;乙酸會破壞膠原成分,降低ECM的強度,而對硫酸鹽黏多糖的影響較小。堿因其完全去除了ECM中的生長因子,嚴重影響其機械性能,基本只用于早期處理表皮的脫毛。

(2)低滲和高滲溶液:高滲溶液可以分離DNA和蛋白質,低滲溶液可以溶解細胞。為發揮最大作用,經常將低滲和高滲溶液交替使用,但此法耗時長,處理后的組織易水腫,且不能完全溶解掉細胞殘余物,還需進一步處理。

(3)洗滌劑:分為離子型、非離子型和兩性離子型洗滌劑。通過溶解細胞膜并將DNA從蛋白質中分離,脫細胞效果明顯,然而這些洗滌劑會將ECM中的蛋白質成分去除,蛋白質的丟失程度隨著洗滌時間的增加而增加。多種洗滌劑同時使用會增加ECM蛋白的丟失,優點是有利于脫細胞之后洗滌劑的去除。與酶相比,非離子型洗滌劑TritonX-100能夠更有效的從致密組織中去除細胞成分。離子型洗滌劑十二烷基磺酸鈉(SDS)相比于TritonX-100能更好的從致密的組織或器官中去除細胞核成分,同時保持其機械性能;在完全去除細胞核成分中起至關重要的作用,但是會引起一些超微結構的破壞和生長因子的丟失。兩性離子型洗滌劑3-[(3-膽固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸(CHAPS)對薄的組織(比如肺)作用較強,但是對于較厚的組織,即使與SDS聯合使用,脫細胞效果仍然很弱。需要注意的是,脫細胞之后必須將ECM中殘余的洗滌劑去除,特別是SDS,它能夠穿透入較厚和致密的組織,即使在較低濃度時仍對再種植的細胞顯示毒性。

(4)醇類:甘油通過脫水和溶解細胞發揮作用;甲醇和乙醇能使蛋白質沉淀,進而破壞ECM的超微結構。

2.生物因子(1)酶:能夠用于脫細胞的酶包括核酸酶、胰蛋白酶、膠原酶、脂肪酶、中性蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶和α-半乳糖苷酶,去除細胞成分方面有較高的特異性。然而,用單一的酶來完全去除細胞成分難以達到預期的目的,且殘留的酶不利于細胞再種植,并且存在誘發不利免疫應答的可能。核酸酶可以裂解核酸序列,可用于去除殘余的核苷酸。胰蛋白酶是一種常用的脫細胞因子,然而,ECM中的蛋白質如膠原蛋白對胰蛋白酶的抵抗能力較弱,因此使用時應格外小心。與洗滌劑相比,胰蛋白酶對彈性蛋白和膠原蛋白破壞力較大,脫細胞速度較慢,但能更好的保護糖胺聚糖。胰蛋白酶脫細胞效果及對ECM的影響程度與時間相關,單獨使用胰蛋白酶完整脫細胞需要很長的時間。值得注意的是,胰蛋白酶可以破壞組織的超微結構,有利于后續的脫細胞因子的滲透,因此在初始階段使用胰蛋白酶可以起到較好的作用,特別是要從一些致密的組織中完全去除細胞核。脂肪酶有協助去脂作用。中性蛋白酶的脫細胞效果較好,但會伴隨著ECM更大程度的破壞。(2)非酶因子:螯合物如乙二胺四乙酸(EDTA)和乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)有助于細胞從ECM蛋白中分離,但是,單獨使用螯合物即使通過振蕩也難以將表層細胞脫去。因此,它們經常和酶(如胰蛋白酶)或者洗滌劑聯合使用。聯合使用螯合物與高/低滲溶液脫細胞的效果尚不明確。3.物理和其他因子(1)溫度:凍融技術能有效的溶解組織和器官中的細胞,對組織的超微結構僅有輕微影響。單次凍融可以減少不利的免疫應答,如白細胞浸潤;應用多次循環凍融對ECM蛋白的含量影響較小。(2)機械振蕩法和壓力:機械振蕩法可通過振蕩產生的能量破壞細胞,多與其他方法聯合使用,可將細胞從基底膜分離,然而不可避免的造成超微結構和基底膜完整性的破壞。靜水壓力所需時間較短,在血管或者角膜組織脫細胞時的效果比洗滌劑或者酶更有效,但是冰晶的形成會影響ECM的超微結構。(3)非熱力學打孔技術:使用微秒的電脈沖流經組織或者組織中的剩余細胞,可以誘導產生細胞膜表面的微空隙,從而破壞細胞內微環境,繼而導致細胞死亡。由于非熱力學打孔技術的探針較小,能用它來脫細胞的組織較小,應用明顯受限。

二、脫細胞支架的滅菌

脫細胞支架制備成功后將進行系列體內外實驗,在此之前對支架的滅菌十分重要,常使用去除熱原法來清除殘余的內毒素、病毒和細菌DNA。生物支架可以置于酸或者其他溶劑中以達到滅菌的目的,但是該方法滲透能力不強,且會損傷重要的ECM成分;環氧乙烷對ECM的機械性能影響較大,并引起不利的免疫應答,進而影響移植后正常功能的發揮;γ射線、電子束輻射等滅菌方法會改變ECM的超微結構和機械性能;超臨界二氧化碳對ECM和支架的機械性能的影響較其他方法小,目前成為一種替代方法。

三、肝臟脫細胞支架的制備方法

脫細胞器官優良的性能為其成功應用于肝臟帶來希望。Shupe等首次報道了嚙齒類動物肝臟的脫細胞,通過下腔靜脈置管,門靜脈切斷,上腔靜脈結扎,PBS去除血管內剩余血液,依次用濃度為1%、2%、3%的TritonX-100各300ml以5ml/min的速度灌注肝臟,以含0.1%SDS的PBS液300ml沖洗。脫細胞肝臟經HE染色,顯示完整的ECM網狀結構;免疫組化染色表明Ⅳ型膠原和層黏連蛋白均保留,且膠原存在于基質中,而層黏連蛋白存在于血管的基底膜中。將106個大鼠肝臟前體細胞WB344置于RPMI1640培養基中,通過置管的下腔靜脈注入肝臟進行再種植,構建出組織工程肝臟。另有文獻報道,經門靜脈插管以1ml/min灌注梯度濃度的SDS(0.01%、0.1%、1%)各24h,用蒸餾水灌注15min、1%的TritonX-100灌注30min清除剩余的SDS。PBS沖洗1h后,從門靜脈注入染色劑可以清楚地觀察到完整的血管結構。將其中一葉置于0.1%的過氧乙酸中滅菌。組織學分析顯示,在支架中幾乎無細胞核結構;免疫組化分析Ⅰ型膠原、Ⅳ型膠原、纖連蛋白、β1層黏連蛋白,結果表明其在ECM的結構和血管基底膜的完整性方面與正常肝臟相當,DNA含量分析證實支架中DNA低于3%。大鼠來源的肝細胞經門靜脈以15ml/min灌入,3D動態培養2周,分別于種植后4h、1、2、5d行組織染色,結果表明4h時,大多數細胞存在于血管內或者血管周圍,1d和2d時,細胞離開血管,分布到基質中。該文獻首次報道了將肝細胞種植到支架上后白蛋白分泌、尿素合成等功能的發揮,再種植成功的肝臟被移植到單側腎切除的大鼠體內。Baptista等采用小鼠、大鼠、雪貂、兔和豬,分別經由門靜脈插入不同尺寸的導管,通過蠕動泵以5ml/min的速度注入總量約為40倍肝臟體積的蒸餾水,后以1%的Triton-X100和0.1%氨水灌注肝臟去除細胞,最后以蒸餾水去除殘余洗脫劑。將人臍靜脈內皮細胞和人胚胎肝細胞種植到肝臟支架中,同時通過門靜脈以3ml/min循環灌注RPMI1640培養基16h,首次證實了人肝細胞前體細胞具有在脫細胞肝臟支架上生存的潛力。功能測定顯示,培養液中的尿素和白蛋白水平明顯高于單純將人胚胎肝細胞置于培養液中的方法。另有文獻報道一種改良的脫細胞方法,以RPMI1640培養基灌洗10min,再用混有SDS的磷脂酶A2沖洗30-60min,直到組織透明,流出液澄清,再以高滲鹽水及核酸酶分別沖洗,直到灌洗液在280nm及260nm的吸光度皆呈陰性,最后以RPMI1640培養基沖洗2h,所制備支架具有將肝臟前體細胞分化成肝細胞和膽管上皮細胞的能力。然而,上述文獻都僅限于嚙齒類動物,Barakat等采用新的方法制備豬脫細胞支架,并進行人肝細胞種植:以SDS進行去細胞,右前葉作為種植細胞的支架,含有肝細胞生長因子的胚胎肝細胞和胚胎星狀細胞作為種植細胞,灌注液中含有肝細胞生長因子和其他所需營養物質,通過測量灌注過程中氧分壓、二氧化碳分壓、乳酸、葡萄糖、尿素氮和白蛋白量進行肝臟代謝和合成功能的評估。結果表明,再生的肝臟呈現活躍的代謝能力,并保留白蛋白的合成能力,種植細胞分化為成熟的肝細胞。因此,ECM對于細胞的種植至關重要,具有支持細胞生長、促進前體細胞特異性分化的作用。Hammond等通過將肝臟脫細胞支架移植到正常肝臟和部分肝切除的肝臟中,證實了這一觀點。首要的觀察指標為肝細胞DNA的合成和肝組織滲透進入支架的程度;其次的觀察指標為非實質細胞的DNA合成、肝重量的測定、肝功能測定以及移植物周邊的細胞生長情況。結果令人振奮,支架種植到正常肝臟4d后,支架周邊有更多的肝細胞增殖,7d后更多的肝臟組織滲透進入支架中;部分肝切除術后2d,種植支架的肝臟較單純部分肝切除的肝臟有更多的肝細胞增殖。

篇4

1環境保護的系統性分析

環境保護是全人類共同的話題,在社會快速發展的過程中,環境保護已經成了人們發展的共識。其中環境保護主要是指人們生存環境的保護以及經濟的可持續發展,將人與環境之間的關系相互協調在一起,進而解決人們生存發展過程中存在的威脅。環境保護工作包括了多種不同的內容,比如自然環境保護、生態環境保護、地球生物保護等等。在這里我們也可以看出,環境保護是一項系統性較強的工作,所涉及的內容也相對較多,并且在很多領域中也都有所體現,比如自然科學、社會科學、法律、經濟等。近年來,工業化快速發展的過程中,環境保護的任務相比以往也有了新的挑戰,因此環境保護工作開展的過程中,我們也必須要改進發展,通過先進的環境保護技術的應用,來更好的提高環境保護工作的質量和效率。

2信息技術在環境保護中的應用現狀

信息技術的發展為人們的工作生活帶來了很大的便利,在環境保護工作中,應用信息技術也能夠有效幫助環境保護工作開展。采用新的信息化技術和新的管理方法,環境保護工作的效率和質量都有了大幅提高。而隨著環境保護部門各項系統的不斷發展完善,新的環境保護系統體系也開始成了目前環境保護工作中必不可少的重要內容。其中很多信息中心都建設了專門的通信網絡以及硬件系統和軟件系統,同時還有專門的人員來對環境污染的情況進行分析和研究,通過對相關信息的獲取來掌握生態環境的保護都需要開展哪些工作,這樣也能夠最大限度的促進環境保護的預防和改善。

3信息技術在環境保護信息系統的應用

3.1環境保護信息系統的主要結構與功能

環境保護信息系統并不是單獨存在的,其中也包括了多方面技術的應用,比如3S技術、模型技術、人工智能技術、互聯網技術等等,這些技術的應用不僅影響著整個環境保護信息系統的質量,同時也有助于提高環境保護信息系統的應用質量。在環境保護信息系統中,對于信息的獲取、顯示以及分析表達等都需要通過信息技術來作為支持,而信息技術的發展也直接的促進了環境保護信息系統的發展,因此,在環境保護信息系統中,我們也必須要最大限度的提高信息技術的發展和應用,這樣也才能夠更好的促進我國環境保護信息系統的發展。

3.2計算機技術應用于環境保護信息系統的管理

目前,計算機技術也是人們日常生活中必不可少的重要技術,在人們工作、生活的方方面面都有著重要的提現。其中環境保護信息系統在應用的過程中對于信息數據的采集、傳輸、存儲以及使用等都需要通過計算機技術來加以實現,并且在計算機技術應用的過程中,也能夠促進環境保護信息系統更好的發展,無論是在對環境保護信息資源的共享上還是提高資源的利用率上也都有著非常明顯的作用效果。環境保護信息系統的數據采集、錄入、傳輸、分析、存儲、表達和應用,無不需要依靠計算機技術,建立完整的環境保護信息系統,可以增強環境保護信息的共享,提高資源利用率和孤效率。

3.3互聯網技術與環境信息系統的融合更能實現環境保護質量的提高

環境保護的目的是促進人類、社會與資源的協調發展,滿足當代人的發展又不損害后代的利益,也就是說,環境信息系統獲取的環境信息、研究的環境保護對策、環境處理工藝等都需要及時的向大眾傳播,應用于現實,而互聯網的運用不僅可以加速信息的傳播,為大眾提供快捷、全面的環境信息,提高環境保護信息系統的服務質量和效率,對提高大眾參與度也具有不可忽視的作用。

43S技術在環境保護信息系統中的運用

3S技術是指環境保護信息系統中最重要的技術。3S技術是指GIS(地理信息系統)、RS(遙感技術)、GPS(全球定位系統)技術。3S技術結合了空間技術、衛星定位、導航系統、傳感技術、通訊技術、計算機技術等多項綜合技術,隨著信息技術的發展,3S技術的部分功能可以實現融合和集成,對信息的采集、錄入、編輯、管理、分析、表達、傳播和應用具有重要作用。

4.13S技術利于環境保護信息系統中的模型制作

環境信息的獲取,環境保護的規劃、決策制定很多時候要依靠合理的模型來作參考。3S技術結合了地理學、城市空間學、環境科學等,通過計算機技術和信息技術能實現地理信息、環境空間的信息的獲取、分析、管理和運用,所以,當3S技術和環境模型相融合和集成時,可為大氣、水、土壤、城市、人口等的空間分布和要素分析形成點、線、面的空間模擬實體,并且可表現其相關屬性,方便分析和決策。

4.23S技術與ES技術結合使環境保護信息系統更加智能化

ES即專家系統,因其強大的定性分析能力,是人工智能近年來被應用的最廣泛的一個分支。ES系統的核心問題是系統知識的權威性、簡明性和廣泛適用性,ES的定性分析能力和3S技術的結合,可以使環境保護信息系統更為準確、便利的進行模型選擇、評估、校正,對提高環境信息管理,發揮系統的決策功能具有實際意義。

4.33S技術與仿真系統集合提高了環境保護信息系統的交互性

環境保護面臨的問題是非常復雜和廣大的,絕大多數需要依靠仿真技術。無論是大的環境問題中復雜環境信息和系統的研究和構建,比如大氣、水體、土壤等不同條件下的不同污染物的量控制、研究和治理方法的實施等,還是小的環境問題比如具體的某種污染物的處理工藝的實驗、分析,處理系統的審核、改進等,都需要集合模型技術、仿真技術在仿真的環境下進行操作,3S、三維動畫、多媒體、多傳感器、高分辨顯示器等結合營造的仿真環境,可以增強工作人員的環境感,增強人機的交互,大大提高工作效率。

4.43S與在線監測技術融合使環境保護信息系統更具實用性

環境保護信息系統最重要的功能之一是實行環境監測。污染物的濃度、來源、變化等監測數據是后面分析、采取應對措施的依據。3S技術中的GPS定位功能對監測十分必要。

環境保護是涉及多個方面多個領域的系統工程,應用先進的計算機技術,建立環境保護信息系統,對環境保護適應社會發展,與時俱進,提高保護質量和效率具有重要意義,文章對計算機技術在環境保護信息系統中的應用情況作了分析,具有一定的現實意義。

作者:魏東凱 單位:撫順市順城區環境監察局

參考文獻

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1常用緩沖材料

發泡植物纖維是近幾年來研究的一個熱點,國內外都在努力開發這類材料。國外主要研究不添加化學發泡劑,通過水蒸氣的作用發泡,形成顆粒型發泡紙漿;而國內則是采用發泡劑產生發泡,工藝較簡單,但是生產和使用后對環境具有隱患,該技術還有待改進和提高。順應當代環保及綠色理念,許多新型緩沖材料不斷產生。成培芳等以淀粉/纖維作為原料制備可降解緩沖包裝材料。Shi等和Lu等分別以向日葵莖稈和毛竹竹漿作為開發生物緩沖包裝材料的原料,與發泡聚乙烯材料相比較,其物理特性和緩沖系數表現出更好的防護性能,并且安全無污染,可以替代石化產品作為新型的生物緩沖包裝材料。

2緩沖材料的減振作用

研究各種緩沖材料的減振效果,有助于設計和開發減振包裝。不同緩沖材料類型、緩沖材料的厚度、包裝結構吸收振動沖擊的能量不同,減振效果表現不同。緩沖材料對果蔬振動保護的作用主要在于緩沖襯墊對沖擊能量的吸收、沖擊對緩沖襯墊的壓縮變形,緩沖材料的種類、厚度、包裝結構對其減振效果都有一定的影響。了解各種因素對減振效果的影響對減振包裝設計具有很強的理論指導作用。

2.1材料種類

具有高滯后吸收能量的材料,如塑料、紙板、泡沫、植物纖維等,均能夠減少運輸中振動損傷的程度,但是不同的緩沖材料對果蔬減振效果不同。Raghav和Gupta用寬松的水稻秸稈和紙碎片作為水果層之間的緩沖材料,發現沒有緩沖包裹的水果比包裹的水果腐爛速度要快得多,說明水果層之間的緩沖材料有利于減少運輸振動損傷。以竹籃為包裝材料時芒果損傷程度嚴重,以泡沫網包裹的瓦楞紙箱對芒果具有最優的保護作用。紙包裹和泡沫網都能大大減少黃花梨的運輸振動,泡沫網緩沖材料對于保持黃花梨貯運品質效果更好,而紙包裝的黃花梨酶活性比泡沫網箱高出許多,但是硬度反而降低。Jarimopas等發現塑料和紙板均具有降低沖擊損傷作用,但是紙板的減振效果優于塑料板,緩沖能量與蘋果的大小無關。Chonhenchob和Singh認為紙板緩沖和泡沫網緩沖材料具有相似的保護作用,但是紙板包裝更有利于番木瓜的成熟。但是Çakmak等認為在中長期高速運輸過程中,紙板包裝運輸增加了果品內部的溫度,導致果品品質的降低,而聚苯乙烯包裝盒可以減小這種負面反應。李春飛等也發現,采用瓦楞紙板襯墊、發泡塑料網作緩沖包裝時,均可有效地降低蘋果損傷率,發泡塑料網對蘋果的整體保護特性優于瓦楞紙板襯墊。

2.2材料厚度

不同厚度的緩沖材料產生不同的緩沖作用,在一定范圍內,緩沖材料的厚度越大,緩沖吸收能量越大,減振效果好。多層瓦楞紙板能量吸收顯著大于單層,多層瓦楞紙板抗沖擊能力強,雙壁瓦楞紙板箱較單壁有利于減少蘋果的損傷率。當緩沖材料厚度超過一臨界值時,甜羅望子損傷率不再發生變化,以30%5mm大小的泡沫球與甜羅望子混合在15cm直徑、20cm高度的瓦楞紙箱中,甜羅望子的損害率最小。

2.3包裝結構

包裝結構的不同對緩沖性能也有一定的影響,盧立新等研究表明,瓦楞紙板襯墊與隔檔可以減小梨損傷率達15%~25%,瓦楞紙板襯墊、隔檔以及網罩的聯合包裝形式可以使梨損傷率減小35%~45%。實際物流過程中,果品常常堆積多層,研究發現多層蘋果的總損失體積與其吸收總能量存在線性關系,而其中的單個蘋果不存在線性關系,盧立新建立了多層果實跌落沖擊模型。

包裝箱所處堆碼層數對果實的振動損傷有重要的影響,最上層包裝箱內梨果實的損傷最大,最下層梨果實的損傷次之,中間層梨果實的損傷最?。辉谕话b箱內,最上層梨果實損傷最大,中間兩層次之,最下層最小。但是李春飛等研究發現,瓦楞紙板內部隔檔可以減小蘋果的損傷率,同一種緩沖包裝的中間層蘋果的損傷率最大,底層蘋果損失率次之,頂層蘋果損傷率最小。雙壁瓦楞紙板箱較單壁減振效果較好,多層瓦楞紙板作為緩沖介質夾層結構減振效果較好,因為多層波紋夾層結構振動能量吸收顯著大于單層結構,多層瓦楞紙板具有重復抗沖擊能力,減小果實的振動損傷程度。

模擬振動試驗

運輸過程中不同路面造成的沖擊和振動之間的加速度存在明顯差異,在模擬振動損傷時,必須把沖擊和振動分開,達到實際振動隨機性。通過模擬運輸試驗,在實驗室內再現實際運輸環境,通過包裝內果蔬的損傷情況來評定包裝系統的減振效果,是目前開發或改進緩沖包裝,解決果蔬運輸損傷的最有效途徑??稻S民等通過模擬運輸振動試驗,確定了運輸模擬試驗的振動頻率、振動加速度、振動時間參數。Thompson等通過模擬振動運輸開發了一套新的水果包裝系統,當結合一個塑料翻蓋或瓦楞紙板控制器時,這套包裝運輸系統幾乎可以防止梨的所有振動損傷。

1振動頻率

通過模擬實際運輸條件,在一定頻率范圍內進行振動掃描,確定共振頻率。黃翔飛等發現,共振頻率隨著包裝箱層數的增加而增大,箱內梨果實的共振頻率隨著激勵源加速度的增加而減小。在相同加速度條件下,振動頻率越小,梨越容易產生損傷。因此,果蔬損傷主要產生在低頻范圍內,Barchi等研究發現,在頻率為13-25Hz范圍內,枇杷損傷從底部到頂部逐漸加強。Shahbazi等模擬卡車運輸西瓜的研究中也發現,在7.49Hz和13.03Hz產生損傷率峰值。但是,Berardinelli等模擬梨運輸振動損傷時發現,振動頻率與振動加速度會產生交互作用,在出現振動加速度峰值的頻率范圍內,不同包裝箱所處位置所受的振動加速度不同,因此在減振包裝設計時,應考慮到多方面的影響因素。

2振動加速度

振動加速度分為穩定振動條件和隨機振動條件下的加速度,隨機振動條件下進行模擬振動試驗,以隨機振動加速度進行實際運輸時間的振動,水果的振動損傷和實際運輸條件下的相同。振動時間和振動加速度具有相關性,為提高試驗效率,縮短試驗時間,在進行模擬振動試驗時,可以通過改變振動加速度來確定振動時間。模擬振動時間越長,梨果實損傷越大。

振動時間對梨果實損傷也受到包裝方式的影響,不同包裝方式條件下,梨果實損傷隨振動時間的變化不同。振動加速度越大,梨越容易受損傷,西瓜振動損傷隨著加速度的增加而增加,而且西瓜肉的損害明顯高于西瓜皮。貨車前后部的振動加速度幅值最高峰分別是0.51和0.83m/s,車廂后部的振動加速度顯著高于車廂前部,使得車廂后部的梨損傷要高于車廂前部同樣高度堆放的。在車廂內同一位置,頂部塑料箱所受的振動加速度高于底部塑料箱,因此,裝載頂部塑料箱內的梨損傷情況顯著高于裝在底部塑料箱的。但是Zeebroeck等研究發現在高峰值加速度時,位置從高往低,擠壓不斷加強,因此蘋果受到的擠壓損傷逐漸增加。

3振動損傷檢測

果蔬模擬損傷運輸過程中往復振動產生的損傷,可以根據Palmgren-Miner理論和S-N曲線來定量評價。果蔬因振動引起的機械損傷會產生一系列生理異常,影響果蔬的貯藏,如表皮腐爛、呼吸加強、乙烯釋放量增多、電導率升高等。Jiang和Shiina研究表明,以表皮破損程度、呼吸和乙烯、電導率和吸光度為指標,可以評價振動引起的果蔬損傷程度。

由于果蔬損傷后能量吸收發生變化,可以通過能量吸收、聲波和超聲波、X射線、熒光、核磁共振等物理方法來檢測振動損傷。通過實驗室模擬公路運輸果蔬所受的振動,可以從振動頻率、振動加速度和振動時間等不同方面來研究果蔬振動損傷模型,有很強的理論指導意義和現實價值,有助于加強貯運中果蔬保鮮和減少果蔬損傷,同時也是減振包裝設計步驟中關鍵的一環。

減振包裝設計

減振包裝,又稱為防振、隔振包裝,它是通過在包裝內設計具有高阻尼特性的隔振墊層,使外界振動傳遞到被包裝產品后,產品被激勵的加速度不超過脆值,減小產品在功能和形態上的損傷。減振包裝設計形式大致可以分為兩類:一類是以防沖擊破損為主的包裝設計,應選擇具有強壓縮能力、高彈性的材料,適用于沖擊破壞強度高于振動破壞強度的產品;另一類是以減振為主的包裝設計,側重強衰減能力、高阻尼特性材料,適用于由于長期運輸振動易產生疲勞損傷、脆值低的產品,例如振動敏感性強的水果和蔬菜,因此果蔬的減振包裝設計常以防振為主要目標。

減振包裝設計的核心在于調節防振襯墊的傳送率來控制產品的共振響應,產品、容器以及高阻尼性材料構成產品包裝系統,可以看作“質量-彈簧系統”模型,當忽略外包裝箱的彈性和緩沖材料的質量時,可視為單自由度線性模型。

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隨著社會經濟的快速發展,圖書館逐漸朝著市場化、網絡化的方向發展,這就使得圖書館需要處理的信息更加復雜,而要提供的信息也更加廣泛。在圖書館情報工作中,為確保各項信息的準確性,必須從海量的信息資源中,剔除無效信息,并對信息資源進行分類處理,從而為人們提供更加方便的服務,信息技術的應用,能有效地幫助圖書館工作人員處理分析信息,極大的減輕了工作人員的工作強度,提高了工作人員的工作效率。

1.2優化圖書館信息資源

目前,很多圖書館都設置有數字圖書館,數字圖書館是一種信息資源共享、館藏資源數字化的信息系統,但受互聯網的沖擊,數字圖書館中蘊含著很多無效資源,信息技術的應用,能幫助圖書館工作人員從這些無效資源中找到有用的信息,并通過檢索方式,快速的搜索出這些信息資源,極大的提高了信息資源的利用率。

1.3網絡環境下圖書館情報工作的新問題

在網絡環境下,各種信息資源越來越豐富,網絡信息已經遠遠超過文獻信息的增長,在信息爆炸的網絡環境中,圖書館情報工作面臨的信息數據越來越多,這極大的增加了有用信息的查找難度。網絡信息的急劇增加不但沒有緩解人們對信息的需求問題,還增大了網絡信息與人們個性化信息需求的矛盾,這無疑拯增大了圖書館情報工作的難度。在以往的圖書館情報工作中,人們都是通過情報服務機構的文獻檢索和傳遞式服務來滿足信息需求的,隨著網絡信息技術的發展,不同地區、不同行業的人們都能在網絡環境中獲得信息,從而滿足自身的個性化信息需求。但仍有少數人由于習慣了傳統的情報信息服務方式,不愿意接受新的情報服務方式,這就對圖書館情報工作的開展造成一定影響。

2圖書館情報信息服務

2.1建立完善的數據庫

在網絡環境下,網絡技術的快速推送功能和大容量儲存功能,極大的改變了圖書館原有的服務方式,拓展了圖書館服務功能,為確保圖書館能為人們提供更好的服務,必須建立完善的數據庫,及時跟蹤各種科研信息、搜集學術論文,并加大對電子出版物網站的關注力度,確保圖書館數據庫信息資源的及時性、有效性,從而有效地提高圖書館服務水平。

2.2加大信息收集力度

圖書館情報工作是為了獲取更多的情報信息,為讀者提供使用,為保證獲得的信息及時、有效,圖書館必須采用先進的信息工具進行信息資源收集,并對這些信息進行有效地處理,從而匯集成簡潔的情報集,供讀使用。在網絡環境下,讀者所需要的信息資源經常會在各個載體中出現,為滿足讀者的需求,圖書館需要加大與外在系統的合作,實現資源共享,從而解決傳統圖書館情報信息資源儲備豐富,但開發不足的現象,這不僅能充分發揮網絡優勢,還能為讀者提供更加全面的信息資源,這對圖書館的現代化發展有很大的幫助。

2.3提高信息處理能力

在網絡環境下,圖書館獲得的情報信息更加廣泛、更加復雜,在這種情況下,圖書館情報人員需要有更加敏銳的信息分析能力和判斷能力。因此,圖書館情報人員要不斷豐富自身的文化底蘊和知識基礎,擴展視野,更快、更準確、更正確的判斷情報信息,并從海量的情報信息中,獲得有價值的信息,從而適應圖書館信息化發展的需求。

3信息技術在圖書情報工作中的應用反思

3.1信息技術的不足

在圖書館情報工作中,信息技術雖然有不可代替的地位,但信息技術也不是萬能的,很多情況下,信息技術并不能代替其他工作,如信息技術并不能改善當前圖書館的管理狀況,技術大多數是由管理發展出來的,如果管理不到位,就無法為技術的更新提供保障,這也使得信息技術的優勢無法充分體現出來;信息技術并不能代替文獻信息,文獻信息是圖書館的象征,圖書館不能因為吸引廣大讀者而使用數字圖書館代替文獻信息;信息技術的應用是為了促進圖書館的發展,利用信息技術對圖書館情報信息進行分析,從而發現存在的不足,優化圖書館情報工作。

3.2圖書館文化的變化

在圖書館情報工作中應用信息技術時,要與圖書館文化緊密的聯系在一起,在網絡環境下,隨著圖書館情報工作方式的轉變,很多工作人員難以適應,如果工作人員沒有做好準備,很難改變技術實施過程,這就使得信息技術難以獲得預期的效果。因此,在圖書館情報工作中采用信息技術時,要注重信息技術與圖書館文化的有效結合,利用圖書館文化幫助圖書館情報工作人員掌握信息技術,從而為信息技術的實施打下良好的基礎。

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3: 吉林省林業設計院網絡中心網絡改造與發展規劃.

4: 吉林省林業系統生態信息高速公路構建課題.

二、論文撰寫與設計研究的目的:

吉林省的林業分布十分廣泛,以長白山系為主要脈絡的山地廣泛分布各種森林資源,而作為林業及林業環境的發展,林業生態信息則是一個更為龐大的系統,快捷,準確,合理,系統的采集,處理,分析,存儲這些信息是擺在我們面前的十分現實的問題.在信息交流的這個世界中,信息好比貨物,我們需要將這些貨物(信息)進行合理的處理,其中以硬件為主的計算機網絡系統是這些貨物(信息)交流的"公路"和"處理廠",我做這個題目,就是要為它畫出一條"公路"和若干"處理方法"的藍圖.

由于森工集團這樣的特定企業,其一,它是一個統一管理的企業,具有集團化的特點,網絡的構建具有統一性.其二,它又在地理上是一個分散的企業,網絡點也具有分散性.然而,分散中還具有集中的特點,它的網絡系統的設計就應該是板塊化的.從信息的角度來講,信息的種類多,各種信息的采集傳輸處理角度也不盡相同,我們在設計的過程中不僅要考慮硬件的地域布局,也要考慮軟件平臺的配合.

沒有最好,只有更好;更新觀念,大步向前.我相信,在導師的精心指導下,經過我的努力,我將為它們創造出一條平坦,寬闊的"高速公路".

1,論文(設計)研究的對象:

擬訂以吉林省林業系統為地理模型,以林業網絡綜合服務為基本需求,以網絡拓撲結構為設計方向,以軟件整合為應用方法,開發設計一套完整的基于集散集團企業的企業網絡系統.

2,論文(設計)研究預期達到目標:

通過設計,論文的撰寫,預期達到網絡設計全面化,軟件整合合理化,網絡性能最優化,資金應用最低化,工程周期最短化的目標.

3,論文(設計)研究的內容:

一),主要問題:

設計解決網絡地域規范與現有網絡資源的利用和開發.

設計解決集中單位的網絡統一部署.

設計解決多類型網絡的接口部署.

設計解決分散網絡用戶的接入問題.

設計解決遠程瘦用戶網絡分散點的性能價格合理化問題.

設計解決具有針對性的輸入設備的自動化信息采集問題.

合理部署網絡服務中心的網絡平衡.

優化網絡服務系統,營造合理的網絡平臺.

網絡安全問題.

10,基本應用軟件整合問題.

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二),論文(設計)包含的部分:

1,地理模型與網絡模型的整合.

2,企業內部集中部門網絡設計.

3,企業內部分散單元網絡設計——總體分散.

4,企業內部分散單元網絡設計——遠程結點.

5,企業內部分散單元網絡設計——移動結點.

6,企業網絡窗口(企業外信息交流)設計.

7,企業網絡中心,服務平臺的設計.

8,企業網絡基本應用軟件結構設計.

9,企業網絡特定終端接點設計.

10,企業網絡整合設計.

5,論文(設計)的實驗方法及理由:

由于設計的過程并不是工程的施工過程,在設計過程中詳盡的去現場建設肯定有很大的難度,也不是十分可行的,那么我們在設計的階段就應該進行仿真試驗和科學計算.第一步,通過小型網絡測試軟件平臺,第二步,構建多個小型網絡搭建全局網絡模擬環境,第三步,構建干擾源利用小型網絡集總仿真測試.

6,論文(設計)實施安排表:

1.論文(設計)階段第一周次:相關理論的學習研究,閱讀參考文獻資料,制訂課題研究的實施方案,準備試驗用網絡硬件和軟件形成試驗程序表及試驗細則.

2.論文(設計)階段第二周次:開始第一輪實驗,進行小型網絡構建試驗,模擬網絡服務中心,模擬區域板塊,模擬遠程及移動網絡.

3.論文(設計)階段第三周次:進行接口模擬試驗,測試軟件應用平臺,完善課題研究方案.

4.論文(設計)階段第四周次:完成第一輪實驗,提交中期成果(實驗報告1).

5.論文(設計)階段第五周次:進行第二輪實驗,模擬環境(干擾仿真)實驗,提交實驗報告2.

6.論文(設計)階段第六周次:完成結題報告,形成論文.

三,論文(設計)實施工具及參考資料:

小型網絡環境,模擬干擾環境,軟件平臺.

吳企淵《計算機網絡》.

鄭紀蛟《計算機網絡》.

陳濟彪 丹青 等 《計算機局域網與企業網》.

christian huitema 《因特網路由技術》.

[美]othmar kyas 《網絡安全技術——風險分析,策略與防火墻》.

其他相關設備,軟件的說明書.

1、論文(設計)的創新點:

努力實現網絡資源的全面應用,擺脫將單純的網絡硬件設計為企業網絡設計的模式,大膽實踐將軟件部署與硬件設計階段相整合的網絡設計方法.

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2攤鋪機日常技術保養

(1)清潔攤鋪機:清除攤鋪機表面堆積的泥塊、粘沙和瀝青等;清除發動機、液壓元件和其他部件表面上的塵土、油垢。注意,切勿將污物弄進各加油口和空氣濾清器內。

(2)檢查并排除各部位的滲漏。

(3)檢查攤鋪機各零部件的連接和緊固情況,特別是左右履帶梁和機架、熨平板、分料裝置和刮板輸送裝置的連接螺栓是否松動或斷裂,必要時予以緊固或更換。

(4)檢查加熱系統的噴頭、連接管、氣罐和各開關。

(5)檢查發動機的機油、燃油、冷卻液以及液壓油的數量,并按規定加入新油至油標指示刻度。

(6)檢查各電氣插頭是否有松脫現象。

(7)檢查螺旋分料裝置的葉片是否有裂紋,如有應更換。

(8)檢查集中裝置中脂是否適量。

3周期性技術保養

(1)磨合50h后的技術保養內容

投入使用前,攤鋪機應進行50h的試運行,否則不得投入使用。對50h的磨合運行,應按發動機使用說明書中的有關規定進行。磨合試運行結束后,須按以下內容進行技術保養:

①更換柴油機機油:熱機時放盡舊機油,然后注入新機油;經短期運行后,立即檢查機油油位是否在規定的高度。②更換分動箱和所有減速機(包括行走、分料、輸料減速機)的油;熱機時放盡舊油,然后注入新油。③更換機油濾清器濾芯。④更換柴油精濾器濾芯。⑤檢查液壓油是否達到規定量。⑥檢查發動機冷卻液液位,如不足應加至規定量。⑦檢查加熱系統的噴頭、連接管、氣罐和各開關。⑧檢查橡膠履帶板是否有裂紋,如裂紋長度大于50mm,必須更換。⑨檢查各液壓系統是否有滲漏現象,如有須排除。⑩柴油機每工作50h,必須清理一次空氣濾清器的濾芯。檢查螺旋分料裝置的葉片是否有裂紋,如有應更換。檢查自動找平裝置是否正常。檢查各工作缸是否有滲漏現象,如有應排除。

(2)每工作100h的技術保養內容

①進行日常技術保養的全部項目。

②按柴油機使用說明書中100h的技術保養項目進行保養。

(3)每工作200h的技術保養

①重復100h的技術保養內容。

②按柴油機使用說明書中200h的技術保養項目進行保養。

(4)每工作500h的技術保養內容

①重復200h技術保養中的全部項目。

②按柴油機使用說明書中200h的技術保養項目進行保養。

③檢查機架、油箱等各重要部件的焊接處有無裂紋,履帶梁有無變形。如有予以解決。

④檢查各操作開關、操縱監視裝置的電氣線路是否正常,如損壞須立即修復。

⑤檢查分料裝置的磨損情況。

⑥檢查蓄電池的基本情況,如兩極的氧化情況等。

(5)每工作1000h的技術保養內容

①重復200h時技術保養的內容。

②按柴油機使用說明書中200h的技術保養項目進行保養。

③更換液壓油濾油器濾芯。

④更換柴油機機油。

除以上介紹的周期性技術保養外,在每年的冬季須對攤鋪機進行一次全面的檢查維修,必要時更換各減速機和分動箱的油。

4長期停放的技術保養

如果攤鋪機將停放3個月,應按下列要求進行保養:

(1)按使用說明書中的要求作長期停放的技術保養,并作防銹處理。攤鋪機的隨機附件在清洗后在做好防銹處理,并放在干凈通風的房內。

(2)長期停放時,主機上只能裝有熨平裝置、分料裝置的基本段部分。將熨平板用木塊墊起來。對攤鋪機各點加注新油或脂

(3)將機器內外表面、料斗、熨平板、螺旋分料裝置和刮板輸送裝置等清洗干凈。應盡量停放在庫房;若放在露天,應放在通風處,并用帆布蓋好。料斗、找平缸要全部收回,并涂上脂。

參考文獻:

[1]LTY7.5全液壓攤鋪機使用說明書.天津工程機械研究所與石油物探特車廠,1997.

[2]全液壓攤鋪機關鍵技術研究.機械部天津工程機械研究所,1995.

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①繼電保護自動化技術在母線保護中的應用。母線繼電保護主要包括兩種,即相位對比保護以及差動保護。相位對比保護指的是通過相位的對比方式,提高系統保護母線的可靠性和有效性;差動保護是將特點以及變化都一致的電流互感器設置在母線元件上,當系統母線側邊端子和二次繞組進行連接之后,再將繼電保護裝置安裝在系統母線差動位置。在大電流接地過程中,通過三相連接的方式實現;小電流接地過程中,在相間短路中設置系統母線保護,然后通過兩相連接的方式實現。②繼電保護自動化技術在發動機保護中的應用。發電機是電力系統的重要組成部分,保證發動機的安全、穩定運行至關重要。繼電保護自動化技術在發電機保護中應用主要包括兩個方面:一方面,重點保護,如果發電機定子繞組匝間發生短路故障,將會導致發電機的故障部位溫度上升,破壞絕緣層,威脅發電機的安全運行,通過在定子繞組內安裝匝間保護裝置,能夠有效的防止定子匝間短路故障的發生;如果發電機的單相接地產生的電流超過規定值,通過安裝接地保護裝置能夠對發電機進行繼電保護;通過將發電機中性點、電流、相位進行相互結合,能夠形成縱聯差動保護,實現對發電機的保護;另一方面,備用保護,過電壓保護能夠有效的防止發電機自負荷較低的狀況下發生絕緣被擊穿的現象;過電保護能夠有效的實現對外部短路故障的保護,防止發生短路破壞發電機;當發電機定子繞組發生低負荷問題時,繼電保護裝置能夠自動切斷電源,并發出相應的報警信號,實現對發電機的保護。③繼電保護自動化技術在變壓器保護中的應用。變壓器是電力系統的重要組成部分之一,對電力系統的運行安全性和穩定性具有非常重要的作用。繼電保護自動化技術在變壓器保護中的應用主要包括以下幾個方面:其一,短路保護,變壓器短路保護包括阻抗繼電保護和過電流繼電保護,阻抗繼電保護主要是通過利用變壓器阻抗元件產生的保護作用,阻抗元件運行一段時間之后,會自動切斷電源,以此實現對變壓器的保護;過電流繼電保護主要是在變壓器電源兩邊電源和時間元件中安裝過電流繼電保護裝置,電流元件運行一段時間之后,會自動切斷電源,進而實現對變壓器的保護。其二,瓦斯保護,當變壓器的油箱出現問題時,在故障電弧的作用下絕緣材料和油都會發生分解,產生有害氣體,通過采用瓦斯保護,當油箱出現上述故障時,能夠自動的啟動保護動作,將變壓器電源切斷,同時發出警報信號通知維護人員趕到故障地點進行處理。其三,接地保護,對于不接地變壓器保護,應該采取零序電壓保護措施;對于直接接地變壓器保護,應該采取零序電流保護。④繼電保護自動化技術在線路接地保護中的應用。電力系統的線路錯綜復雜,接地方式也相對較多,因此電力系統的接地方式包括大電流型接地與小電流型接地,當出現大電流接地時,應該立刻切斷電源,防止接地故障對電力系統造成的破壞;當發生小電流型接地時,繼電保護裝置會發出報警信號,電力系統在一定時間內依然可以運行。針對不同的接地故障,應該根據故障狀況采取相應的保護措施,具體狀況如下所示:其一,零序功率,當電力系統發生接地故障時,零序功率的方向發生變化,零序電流波動相對較小,以此實現對電力接地故障的預測以及保護;其二,零序電流,當電力系統線路發生接地故障時,零序電流會迅速上升,繼電保護動作非常敏感,能夠及時的采取切斷電源的保護措施,對電力系統進行保護;其三,零序電壓,電力系統在正常運行時,并不會產生零序電壓,如果電力系統發生接地故障,會導致零序電壓的產生,繼電保護裝置能夠及時的發出相應的報警信號,同時電網維護人員通過觀察電壓表數值能夠判斷系統是否發生接地故障,主要是因為當電力系統發生接地故障時,電壓數值會降低。

1.2實例分析

文章以某電網為例,該電網于2010年應用了繼電保護自動化技術,2011年4月23日,110kV變壓器主變低壓側繼電保護動作,1號主變101開關跳閘,2號主變119、131開關過流保護動作跳閘,重合閘動作,合成功,電網維護人員趕到事故現場,設備并無異常,維護人員通過查看跳閘過的線路,兩條線路故障都能夠合閘成功,但是卻導致越級跳閘。通過對故障進行分析,發現為線路故障,開關拒動,處理方法表現為:把故障開關隔離,恢復供電,然后通知檢修人員認真檢查,查實狀況后采取措施進行檢修。

2繼電保護自動化技術的未來發展趨勢

繼電保護自動化技術的未來發展趨勢主要包括以下幾個方面:其一,智能化,近年來,人工智能技術在電力系統繼電保護自動化中得到非常廣泛的應用,例如模糊邏輯算法、遺傳算法、神經網絡等,通過將這些人工智能技術應用在繼電保護自動化系統中,能夠保證繼電保護自動化系統正確判別故障,并具有智能化解決復雜問題的能力,進而實現繼電保護的智能化;其二,網絡化,計算機網絡技術在國家經濟建設以及能源發展中發揮了至關重要的作用,通過將網絡化技術應用在電力繼電保護系統中,利用計算機網絡能夠將主要設備的繼電保護裝置連接在一起,創建繼電保護裝置網絡,能夠顯著的提高繼電保護的可靠性,因此電力系統繼電保護技術的網絡化是未來發展的一種必然趨勢;其三,計算機化,隨著計算機技術的快速發展,自動化芯片控制的電路保護硬件已經從16位單CPU結構發展為32位CPU微機保護結構,顯著的提高了繼電保護的性能以及響應速度,繼電保護自動化系統的計算機化已經成為不可逆轉的發展趨勢。

篇10

一、理論模型

在經濟理論上效率一般指的是投入與產出之間的關系。Farrell開創了現代公司效率評價方法,他認為廠商的效率包含兩個部分:技術效率(technicalefficiency,TE),反映廠商在投入給定的情況下產出最大化的能力;配置效率(allocativeefficiency,AE),反映廠商在給定投入要素的價格的情況下,選擇最優投入要素比例的能力。其中技術效率還可以進一步分解為純技術效率和規模效率兩部分。

數據包絡分析方法是目前被廣泛應用的一種效率分析方法,它是由著名的運籌學家Charnes和W.W.Cooper等人于1978年首先提出的。數據包絡分析是以相對效率概念為基礎發展起來的一種嶄新的相對有效性的評價方法,它是從樣本數據中分析出樣本集合中處于相對最優的樣本個體。

DEA是使用數學規劃模型比較決策單元(DecisionMak-ingUnit,簡記DMU)之間的相對效率,對決策單元做出評價。各DMU需要具有相同類型的輸入和輸出。通過數學規劃從總體上對各輸入輸出數據進行分析,可以得出每個DMU的綜合效率,這個效率是相對效率,相對效率最高的DMU被確定為有效的DMU,其他DMU與這些有效的DMU之間的差距決定了它們的相對效率。

DEA方法的兩個基本模型是C2R和C2GS2,下面我們先來介紹C2R模型。假設我們研究n家保險公司的相對有效性問題,評價指標體系為m種投入指標,s種產出指標。設aij代表第j個決策單元第i種投入指標總量,bkj代表第j個決策單元第k種產出指標總量。

C2R模型的對偶規劃為:

其中,aij0和bkj0分別代表被評價決策單元的投入和產出變量;xj為第j個決策單元的決策變量;y為投入比例變量。

上述模型的意義在于保持產出不變的前提下,將投入的各個分量按同一比例y(y≤1)減少。如果y<1,則表明可以用比被評價決策單元更少的投入而生產相同的產出,這就說明被評價決策單元不是有效率的;如果y=1,則表明被評價決策單元是有效的生產活動或經濟系統。

C2R模型得到的是規模報酬不變的生產前沿面和規模報酬不變時的效率值,反映的是技術效率。C2GS2模型在C2R模型的基礎上增加一個限定條件即∑Xj(j=1,……n)=1,在這個條件的限定下所得到的生產前沿面是規模報酬可變的生產前沿面,DEA效率值是規模報酬可變時的效率值,也就是純技術效率。C2R模型得到的效率值與C2GS2模型得到的效率值的比值考察的是目標公司的規模效率。顯然,規模效率衡量的是規模報酬不變的生產前沿與規模報酬變化的生產前沿之間的距離。

二、數據及應用

運用DEA方法可以分析企業的配置效率和技術效率,但因為分析配置效率時的價格因素在我國不可得,所以本文的討論僅限于技術效率,其中包括純技術效率、規模效率和規模收益狀況。

(一)參考集的確定

為了全面地反映我國財產保險公司的效率問題,原則上,我們將所考察年份的所有在我國保險市場上營業的財產保險公司都囊括在樣本集中。另外,為了能夠反映近年我國財產保險市場的效率變化情況,使分析結果既有橫向比較也有縱向比較,我們選取樣本的時間跨度為1999年—2004年。由于各年中都有部分公司無法獲得全部指標的數據,只能將這些公司剔除出樣本集。所有公司的所有數據都來自于保險年鑒或是將保險年鑒公布的數據加以整理而得。

(二)評價指標的確定

實踐經驗證明,成功地運用數據包絡分析的關鍵在于正確地選取評價指標體系。因為保險產品的無形性,使得保險產出及投入的界定和衡量比一般企業要困難,在理論界對于如何選取評價指標一直存在爭議,因此有必要在此對于評價指標的設定做出較詳細的討論。

1.產出指標的設定:反映保險公司的負債特性

保險產品的無形性對于產出指標的選取造成很大障礙,而如果從保險公司對社會所起到的作用這個角度來界定保險的產出就可以繞過這一障礙。一般意義上,保險主要承擔兩方面的社會職能,一個是風險保障職能,一個是資金中介職能,其中資金中介職能是派生的、附屬的職能。

(1)資金中介職能的產出:忽略。對于保險的資金中介職能,最客觀的代表指標應該是當年投資資產的增加值,而由于我國財產保險公司的大部分資產都以現金和存款的形式存在,投資資產的額度非常之小,也就是說我國的財產保險公司所提供的資金中介的社會職能非常有限,與保險保障職能不具有同等可比的地位,為了不至于造成評價結果的扭曲,我們將資金中介這一項產出忽略不計。

(2)風險保障職能的產出:年末準備金與賠款支出之和。對于風險保障這一職能的產出指標的設定存在較大爭議,有些學者采用的是保費收人這一指標,有些文章建議采用直觀的指標,比如保單件數或總保額,還有觀點支持以賠款支出作為產出指標。以下對這三種觀點進行分析,分別指出其不當之處,并在此基礎上構建一個本文認為較為合理的產出指標。

首先,保費收入是一個收入概念,實際上是產出乘以價格的概念,而且這里的價格不僅包括風險保障的成分,還包括了公司的投資因素、費用因素及利潤因素在其中,因而用保費收入作為產出指標雖然簡單,但是不夠科學,經不住仔細推敲。其次,件數是一個最直觀也最具體的指標,但因為單純以件為計量單位就忽略了不同保單在風險保障額度和保障程度上的差異,因此件數不是一個合適的產出指標;保額的加總也是一個比較直觀的指標,但是這一指標因為兩方面的原因而不能成立:一是這是一個不易獲得的指標;二是某些險種可以在保險期限內出現多次賠償,而且總賠償額可以大大超過總保額。再次,當年賠款支出這一指標較以上兩種指標選取要更接近于風險保障職能的本質,但其存在一個嚴重的缺陷,那就是用它來度量風險保障職能的產出大小時是不足量的,因為當年賠款只是當年構建的風險池和承擔的風險損失中的一部分,是風險及損失已經發生的那一部分,而已經進入風險池但還沒有實際發生的那一部分風險,或風險已經發生,但保險公司還未因此而遭受損失的那一部分風險是不能在當年賠款中體現出來的。

上述當年賠款支出作為產出指標不足量的問題是可以解決的,因為以上所說的那兩部分風險,即:已經進入風險池但還沒有實際發生的那一部分風險,和風險已經發生,但保險公司還未因此而遭受損失的那一部分風險在保險財務上恰好有其對應的項目,那就是未到期責任準備金和未決賠款準備金,因此,將未到期責任準備金和未決賠款準備金與當年賠款加總,就得到了當年風險保障職能產出的較準確的衡量。

綜上,針對風險保障這一職能,我們設定的產出指標是年末準備金與當年賠款支出之和。

2.投入指標的設定:符合我國財務報表的實際情況

國際上的常用方法是將保險公司的投人分為三大類別,即勞動力投入、資本投入和其他材料投入。但由于我國的財務報表無法區分勞動力投入和其他材料投入,因此我們不能直接套用國際上常用的三大類投入指標。國內的文章在選取投入指標時多采用以下分類:資本金、勞動力和費用。這樣的指標選取有值得商榷之處,首先勞動力投入的貨幣體現是工資支出,而工資支出是費用的一部分,而且是很大的一部分,因此如果將勞動力與費用分別設定為兩個獨立的投入指標,重復計算的問題較嚴重;其次,利用DEA方法分析技術效率時,要求各種投入指標都是不包含價格因素的,而費用等于各種投入的量和各自價格的乘積之和,因而費用不適合作為投入變量。

我們根據可獲得數據的實際情況并綜合其他考慮,將以上國際常用方法具體應用如下:

(1)用職工人數代表勞動力投入。

(2)用所有者權益代表資本投入。此處需要特別指出的是,資本投入應該包括債權資本和所有者權益,但因為債權資本中的絕大部分是由準備金構成的,而準備金又是我們定義的產出指標中的一部分,用同一個變量既表示投入又表示產出顯然是不合適的,所以我們的資本投入只考慮所有者權益而不考慮債權資本的部分。另外,準備金作為債權資本的絕大部分,雖然它實際上對公司的經營發揮了支持作用,但它并不是公司為了達到當年的經營目標而自主選擇的投入要素,或者更直接地說,因為它是由公司的產出而直接決定的,因此保險公司不可以為了提高效率而減小這一部分投入,也就是說考察這項資源的利用效率對公司的經營決策沒有任何實際指導意義,這是我們不將債權資本作為資本投入的另外一個理由。

(3)用固定資產價值代表固定資產這項投入。

(4)用手續費代表其他營銷渠道這項投入。

三、結果分析及建議

由于各年中都有部分公司無法獲得全部指標的數據,只能將這些公司剔除出參考集,最后選定的參考集為,1999年的13家,2000年的14家,2001年的17家,2002年的20家,2003年的23家,2004年的24家。需要特別指出的是,在2001年以前的太平洋保險集團沒有將產險方面和壽險方面的數據獨立公布,因此在參考集中不能包括2001年以前的太平洋財險,基于同樣原因,我們的樣本中也無法包含1999-2003這五年中的平安產險。這對本次測評是一個遺憾。我們利用lindo6.1,得到1999年—2004年所考察的每家財產保險公司的總效率、純技術效率和規模效率,對實證結果進行分析,我們發現不同公司之間的效率差異是比較顯著的,并且從中可以發現以下規律:大公司與小公司相比,大公司的效率值較高,尤其是規模效率,這體現了在我國現階段規模優勢對效率的影響,而中小公司多處于規模收益遞增階段也從另一方面印證了這一觀點;而老公司與新公司相比,老公司的效率值較高,并且多數開業不滿三年的新公司的效率明顯偏低,這可能是由于新公司在最初幾年受到業務規模的限制難以充分利用資源所造成的。

我們分別計算各年中資公司與外資公司的效率平均值,可以得到如表1所示結果,對其進行分析,我們可以做出以下判斷:

(1)外資公司規模效率的平均值均低于中資公司。這種現象的出現部分緣于對于外資公司在諸如進入形式、營業范圍和地域限制等幾方面的政策限制。在我國保險市場高速發展的過程中,各種限制對于規模效率的抑制作用逐漸顯現出來。但隨著我國加入WTO進程的深化,各種限制都將逐步放寬,有些甚至已經取消,外資公司將有機會利用新的政策充分提高規模效率。外資公司應該抓住限制放開的大好時機,擴大規模,獲得規模收益。在諸多經營限制放開以后,制約外資財產保險公司經營效率的外界監管因素已基本消除。財產保險公司需謹慎決策是否尋求更合理的公司形式(如獨資公司形式)、怎樣更好地本土化等問題,積極而合理地擴大生產規模,以獲得規模效率,同時充分發揮技術優勢,提高純技術效率。

(2)在純技術效率上,1999年—2002年外資公司的平均值高于中資公司,但外資公司的平均值逐年下降,并在2003和2004年被中資公司趕上并超過。這說明在純技術效率上,外資公司具有一定的先天優勢。但這一優勢的體現不如規模效率的劣勢那么顯著,這一方面可能是由于各種政策的限制抑制了外資公司技術優勢的發揮,另一方面,中資公司也在逐步借鑒和學習外資公司的技術優勢,提高自身的技術水平。隨著對外開放的逐步深入,對外資的各種政策性限制將逐步放開,并且外資公司的本土化進程也將逐步完善,外資公司的技術優勢將得以完全展露,中資公司能否加快自身完善的過程,趕上外資公司技術進步的進程,將直接影響中外資公司在純技術效率上的較量結果。

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