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Sirtuin在低氧誘導人臍帶間充質干細胞增殖中的作用
關鍵詞：人臍帶間充質干細胞 低氧 增殖 sirtuin
摘要：目的 探討低氧對人臍帶間充質干細胞（h UC-MSCs）中Sirtuin（SIRT）蛋白表達影響及與細胞增殖的關系。方法 組織塊貼壁法分離和培養h UC-MSCs;流式細胞儀鑒定細胞表面標志物;CCK-8法測定低氧與常氧下不同時間點h UC-MSCs的增殖能力;流式細胞儀檢測低氧與常氧下細胞周期的變化;免疫熒光與Western blotting測定低氧與常氧下細胞SIRT蛋白定位與表達。結果 成功分離h UC-MSCs;細胞CD90、CD105、CD29、CD44高表達,CD14、CD19、CD34、CD45、HLA-DR無表達;CCK-8測定低氧培養24、48、72 h細胞的增殖能力均高于常氧培養（P均〈0.05）;在低氧下培養24、48 h后S期細胞比率高于常氧培養（P均〈0.05）;免疫熒光檢測SIRT1、6位于細胞核內,SIRT2定位于胞漿,SIRT3、4、5定位于線粒體。Western blotting測定SIRT1在低氧培養24、48 h蛋白表達量均高于常氧條件（P均〈0.05）,常氧培養72 h的SIRT1表達量高于24 h及48 h（P均〈0.05）;SIRT2表達量在低氧培養24 h高于常氧培養（P〈0.05）,48 h后低于常氧培養,72 h后高于常氧培養（P〈0.05）;低氧培養24、48、72 h后SIRT5的表達量均高于常氧處理（P均〈0.05）,常氧與低氧培養細胞48 h和72 h后均高于24 h時SIRT5的表達（P均〈0.05）。結論 低氧處理24、48、72 h均可以促進h UC-MSCs的增殖。低氧誘導SIRT1、2與5表達改變提示SIRT1、2、5可能參與了低氧對h UC-MSCs增殖的調控。
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