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高壓氧通過上調Cystatin C增強胚胎大鼠皮層神經元對氧糖剝奪的耐受
關鍵詞：高壓氧預處理 胱抑素c 自噬 皮層原代神經元 氧糖剝奪
摘要：目的:探討胱抑素C(Cys C)在高壓氧(HBO)促進胚胎大鼠皮層原代神經元對糖氧剝奪(OGD)耐受過程中的作用。方法:取孕18 d SD大鼠胎鼠大腦皮質進行原代神經元培養。實驗分為對照組(control)、OGD組(OGD)、HBO預處理組(HBO+OGD)、Cys C處理組(Cys C+OGD)和siRNA處理組(Cys C-siRNA+OGD),于培養后第10 d給予HBO預處理24 h,制備氧糖剝奪(OGD)模型,向細胞培養液中補充外源性Cys C或特異性siRNA來增加或下調神經元中Cys C水平,利用乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒檢測細胞死亡。采用Western Blot的方法檢測各組細胞內自噬相關蛋白LC3-II和Beclin-1的表達。結果:HBO預處理可減輕大鼠皮層原代神經元OGD后的細胞死亡,同時上調Cys C、LC3-II及Beclin-1的表達。Cys C-siRNA能夠顯著抑制HBO預處理對神經元的保護作用,并抑制LC3-II及Beclin-1的表達;外源性Cys C具有與Cys C-siRNA相反的作用。結論:Cys C是HBO預處理誘導神經保護效應的重要分子,其內在機制可能為HBO預處理可通過促進Cys C表達,上調LC3-II及Beclin-1的表達,減輕神經損傷。
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