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miR-490-3p通過靶向調控TGFBR1抑制非小細胞肺癌細胞的增殖和侵襲
關鍵詞：肺癌 tgfbr1 增殖 侵襲 遷移
摘要：目的:以非小細胞肺癌A549細胞為模型,探討miR-490-3p在肺癌發生發展過程中的作用及其調控機制。方法:通過miRBase數據庫獲得miR-490-3p序列,設計miR-490-3pmimics并轉染A549細胞,CCK8、細胞劃痕及Transwell實驗分別檢測miR-490-3p過表達對A549細胞增殖、遷移和侵襲能力的影響;使用miRwalk在線工具預測miR-490-3p可能的調控基因,通過實時熒光定量PCR及Western印跡對候選調控基因進行篩選,最后通過雙螢光素酶報告基因實驗驗證miR-490-3p與調控基因之間的靶向關系。結果:過表達miR-490-3p可顯著抑制A549細胞的增殖、侵襲和遷移能力;在預測的miR-490-3p候選靶基因中,選擇與細胞增殖、遷移等表型相關的RASAL2、TGFBR1、PAPPA、HMGA2、TGFA靶基因進行實時熒光定量PCR及Western印跡篩選,結果僅TGFBR1基因在mRNA和蛋白水平的表達與miR-490-3p水平呈負相關,且雙螢光素酶報告實驗證實miR-490-3p可直接與TGFBR1的3'-UTR結合并抑制其表達。結論:miR-490-3p通過靶向調控TGFBR1的表達抑制非小細胞肺癌A549細胞的增殖和侵襲。
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