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紅曲霉LovD基因的克隆及轉基因高產洛伐他汀菌株篩選
沈小瑞; 王鈺; 陳達偉 安徽大學資源與環境工程學院; 合肥230601
關鍵詞：紅曲霉 洛伐他汀 根癌農桿菌 遺傳轉化
摘要：通過紫外誘變篩選出的高產洛伐他汀紅曲霉菌株M120-1為出發菌株,提取紅曲霉菌株總RNA,通過RT-PCR技術克隆LovD基因,構建表達載體,對紅曲霉進行遺傳轉化;通過高效液相色譜法篩選高產洛伐他汀轉化菌株。結果表明:提取紅曲霉總RNA并建立表達載體,隨機挑選出12個轉化子,經PCR鑒定,有10株成功得到轉化。對其進行培養并通過HPLC法測定洛伐他汀產量,其中一株轉化菌株的洛伐他汀產量為0.55mg/mL,比出發菌株產量高63%。對該菌株進行傳代培養,具有良好的遺傳穩定性。
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