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無血清培養基對深低溫凍存復蘇后的間充質干細胞免疫功能的研究
關鍵詞：臍帶間充質干細胞 無血清培養基 細胞凍存 細胞復蘇
摘要：目的:探討無血清培養基對凍存后的間充質干細胞(HUC-MSCs)免疫調節功能的影響,明確其成脂成骨生物學特性,為臨床應用奠定基礎。方法:(1)分離臍帶中的HUC-MSCs,傳代純化后深低溫凍存。(2)凍融后的HUC-MSCs分別以含10%胎牛血清的培養基(SCM),無血清培養基兩種培養條件培養。(3)觀察兩組細胞生長狀態,革蘭染色計數,計算細胞活率。(4)流式細胞術檢測兩組細胞的表面標志物。(5)成脂成骨誘導,茜紅素染色和油紅染色觀察誘導情況。結果:(1)兩組細胞均以漩渦狀貼壁,無血清培養基培養的細胞體積略小。(2)在細胞總數及活性方面,兩組細胞有些微差異,可忽略不計。(3)流式細胞術顯示其對PE-CD34不表達,對PE-CD105、PE-CD90、PE-CD73、PE-CD44和PE-CD29高表達。(4)對無血清培養基(SFM)所培養得到的HUC-MSCs歷經約21 d的成骨細胞和脂肪細胞專向分化誘導,發現其具有可媲美SCM培養的HUC-MSCs的分化能力。結論:無血清培養基同有血清培養基相比,對深低溫凍存復蘇后的間充質干細胞免疫調節功能無明顯差異,可替代有血清培養基進行細胞培養。
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