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云南松胚性愈傷組織誘導研究

謝忠利; 李旦; 陳遠書; 于相君; 古旭; 何承忠 西南林業大學云南省高校林木遺傳改良與繁育重點實驗室; 云南昆明650233; 西南林業大學云南生物多樣性研究院; 云南昆明650233

關鍵詞:云南松 未成熟胚 胚性愈傷組織 誘導率 

摘要:以未成熟云南松種子為研究材料,選擇合適的消毒方法,進行合子胚發育狀態觀測,從外植體類型、采果母樹基因型、培養基種類3方面探討其對胚性愈傷組織誘導的影響,并鑒定了胚性愈傷組織。結果表明:75%乙醇消毒30 s,無菌水沖洗2次,2%氯酸鈉浸泡15 min,無菌水沖洗4~5次為種子最佳消毒方案;不同外植體類型對出愈率影響不顯著,但對胚性愈傷組織的形成具有極顯著影響,取帶胚乳的合子胚作為外植體的胚性愈傷組織誘導率可達34.3%,而合子胚作為外植體時誘導率為14.3%;采用14種培養基接種,平均誘導率在2.2%~17.6%之間,其中接種于MLV+2, 4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+肌醇0.1 g/L,1/2LM+2, 4-D 2.2 mg/L+6-BA 1.1 mg/L+AgNO3 3.4 mg/L+肌醇0.1 g/L,DCR+6-BA 0.63 mg/L+KT 0.61 mg/L+NAA 2.0 mg/L+肌醇0.2 g/L+麥芽糖15 g/L培養基的胚性愈傷誘導率分別為17.6%、17.6%、16.5%,表明該3種培養基適合于云南松的胚性愈傷誘導;8株云南松優株未成熟帶胚乳合子胚的胚性愈傷組織平均誘導率為5.1%~19.4%,最高的是076號云南松,最低的是075號云南松,表明基因型對胚性愈傷組織誘導具有極顯著的影響。

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