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豬源IFN-λ3的克隆、表達及抗病毒活性分析
陳競; 許汪; 宋利娜; 郝鵬飛; 姜宇航; 付婷婷; 金鑫; 金寧一; 李昌 延邊大學農學院; 延吉133000; 軍事醫學研究院軍事獸醫研究所; 長春130122
關鍵詞：豬肺巨噬細胞 抗病毒活性
摘要：為了解豬源IFN-λ3的體外抗病毒活性,本研究利用RT-PCR技術從豬肺巨噬細胞(CRL2845)中擴增獲得豬源IFN-λ3基因(pIFN-λ3),并將pIFN-λ3基因克隆至真核表達載體pcDNA3.1,構建重組質粒pCDNA3.1-pIFN-λ3,利用脂質體轉染293細胞。48 h后通過Western blot分析pIFN-λ3瞬時表達情況,取轉染后上清分別作用于PK15、MDCK細胞進行pIFN-λ3抗病毒活性分析。結果顯示,本研究成功擴增獲得pIFN-λ3基因,并在293細胞內成功表達;瞬時表達能夠抑制表達綠色熒光蛋白的重組水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus-green fluorescent protein,VSVG)在PK15、MDCK細胞上的增殖。本研究結果為深入研究豬源IFN-λ3在宿主抗病毒免疫和黏膜免疫中的作用機理及其應用提供參考和依據。
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