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發熱伴血小板減少綜合征病毒蛋白Gc原核表達及免疫原性研究
關鍵詞：發熱伴血小板減少綜合征病毒 原核表達 免疫原性
摘要：目的對原核表達發熱伴血小板減少綜合征病毒(SFTSV)蛋白Gc免疫原性進行初步研究。方法參照SFTSV HB29病毒株包膜蛋白Gc編碼基因,通過大腸埃希菌密碼子偏好性優化后化學合成方法得到Gc目的基因。將目的基因導入到載體pET-His中,得到表達載體pET-His-Gc。經測序確認后轉化到BL21(DE3)感受態細胞中表達,純化后進行十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和Western blot驗證。蛋白免疫新西蘭大白兔后收集兔血清進行抗體效價測定。結果成功構建了pET-His-Gc融合蛋白表達載體,并在大腸埃希菌中得到可溶性表達,且得到的Gc蛋白具有良好的免疫原性。動物實驗結果表明,3次免疫后兔血清的抗體效價可達到1∶512 000。結論實現了SFTSV包膜蛋白Gc的原核表達,為后續SFTSV包膜蛋白的研究奠定了基礎。
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