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抗牛傳染性鼻氣管炎病毒gD蛋白中和活性單克隆抗體的制備及鑒定
洪家兵; 劉文曉; 王萍; 李永清 江西農業大學動物科學技術學院; 江西南昌330045; 北京市農林科學院畜牧獸醫研究所; 畜禽疫病防控技術北京市重點實驗室; 北京100097
關鍵詞：牛傳染性鼻氣管炎病毒 gd蛋白 單克隆抗體
摘要：為了制備牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV)gD蛋白的單克隆抗體,本研究用純化的IBRV免疫BALB/c小鼠,然后以純化的昆蟲細胞表達的gD蛋白作為ELISA包被抗原篩選雜交瘤細胞株。結果獲得3株能夠穩定分泌抗gD蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株1B4、3E8和4F12。采用夾心ELISA鑒定單克隆抗體的Ig亞類,結果顯示,1B4、3E8為IgG2b,4F12為IgG1。免疫印跡試驗與間接免疫熒光試驗表明,3株單克隆抗體均能與IBRV發生特異性反應。微量中和試驗結果顯示,1B4和3E8單克隆抗體具有中和IBRV的活性,中和效價均為1∶320。本研究成功制備了具備中和作用的抗牛傳染性鼻氣管炎病毒gD蛋白單克隆抗體,為建立特異性的IBRV診斷方法及致病機理的研究提供了工具。
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