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下調(diào)NPM基因表達(dá)對慢性髓系白血病細(xì)胞株K562增殖的抑制作用研究
關(guān)鍵詞：核仁磷酸蛋白 慢性髓系白血病細(xì)胞 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期
摘要：目的:運(yùn)用RNA干擾技術(shù)抑制核仁磷酸蛋白(NPM)的表達(dá),研究NPM基因在慢性髓系白血病細(xì)胞株(K562細(xì)胞)增殖中的作用及其機(jī)制。方法:采用shRNA抑制NPM的表達(dá),應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測NPM基因的表達(dá),MTS法檢測抑制NPM基因?qū)?xì)胞增殖能力的影響,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期的改變,Western blot檢測細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果:成功構(gòu)建了針對NPM基因的shRNA慢病毒載體,并感染K562細(xì)胞。檢測結(jié)果顯示,與對照組相比較,抑制K562細(xì)胞NPM基因的表達(dá)可以抑制細(xì)胞的增殖,減少細(xì)胞集落形成。干擾NPM基因可使G0/G1期延長,細(xì)胞周期阻滯,這可能與下調(diào)NPM基因后激活p21蛋白的表達(dá),進(jìn)而抑制CDK2/CyclinE復(fù)合物形成有關(guān)。結(jié)論:下調(diào)K562細(xì)胞NPM基因的表達(dá),可以通過誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯抑制K562細(xì)胞的增殖。
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