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胱硫醚-γ-裂解酶在三種微血管內皮細胞上的表達

蔡文杰 王銘潔 張宇玲 金惠銘 朱依純 上海理工大學醫(yī)療器械與食品學院基礎醫(yī)學教研室 上海200093 復旦大學上海醫(yī)學院生理與病理生理學系

關鍵詞:硫化氫 微血管內皮細胞 

摘要:目的鑒定微血管內皮細胞上是否表達生成硫化氫(H2s)的酶,為深入研究硫化氫的心血管作用提供新線索。方法原代培養(yǎng)大鼠心臟微血管內皮細胞(CMEC),設計相應引物后用RT—PCR的方法檢測胱硫醚-1-裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-成酶(CBS)基因轉錄情況,進一步用兔抗大鼠CSE和CBS多克隆抗體對CMEC進行蛋白水平的免疫熒光染色。此外對另兩種微血管內皮細胞株RF/6A和bEnd.3也檢測了H2S生成酶的表達。結果三種微血管內皮細胞都擴增出CSE基因的特異條帶,而CBS基因都未擴增出相應產物。CMEC的免疫熒光染色顯示CSE抗體染色為陽性,CBS抗體染色為陰性。結論首次發(fā)現(xiàn)了微血管內皮細胞上存在CSE的表達,提示內皮細胞可以通過生成硫化氫調節(jié)心血管活動。

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