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大豆GmWRI1a基因啟動(dòng)子克隆及其功能分析
關(guān)鍵詞：大豆 gmwri1a啟動(dòng)子 順式作用元件 激素響應(yīng) gus酶活性分析
摘要：為了探究大豆種子油脂合成與儲存基因GmWRI1a的調(diào)節(jié),分析其啟動(dòng)子功能,從大豆品種東農(nóng)50基因組中擴(kuò)增獲得GmWRI1a基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游1669bp的啟動(dòng)子序列,轉(zhuǎn)化擬南芥。GUS染色確定了啟動(dòng)子的有效性,繼而根據(jù)順式作用元件的分布,分別擴(kuò)增得到4個(gè)啟動(dòng)子5'端缺失片段1138bp,1087bp,690bp和437bp。4個(gè)啟動(dòng)子缺失片段分別轉(zhuǎn)化擬南芥后,通過GUS組織染色結(jié)果發(fā)現(xiàn),這些啟動(dòng)子片段能夠驅(qū)動(dòng)下游GUS基因表達(dá)。GUS酶活表明,啟動(dòng)子存在乙烯、茉莉酸、赤霉素3種激素響應(yīng)元件,其中乙烯、茉莉酸和赤霉素的響應(yīng)元件分別分布在-1138~-1087bp、-1087~-690bp和-690~-437bp。
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