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SiRNA干擾靶向抑制酪氨酸蛋白激酶Lck對(duì)哮喘小鼠T細(xì)胞功能的影響
關(guān)鍵詞：rna 小分子干擾
摘要：目的通過(guò)siRNA技術(shù)靶向抑制哮喘小鼠T細(xì)胞非受體酪氨酸蛋白激酶Lck的基因表達(dá)，研究Lck特異性siRNA對(duì)哮喘小鼠T細(xì)胞功能的影響。方法化學(xué)法合成小鼠T細(xì)胞Lck基因21—23bp的RN段，以INTERFERinTMsiRNA Transfection Reagent作為轉(zhuǎn)染試劑，將合成的siRN段轉(zhuǎn)染哮喘小鼠脾臟來(lái)源的T細(xì)胞，作用48h后再與哮喘小鼠骨髓來(lái)源的樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）混合反應(yīng)48h，收集細(xì)胞上清液，ELISA法檢測(cè)細(xì)胞因子IL4、IL-13、IL-2、INF-1；Western Blot法檢測(cè)T細(xì)胞Lck蛋白的含量，判斷其表達(dá)是否被沉默。結(jié)果siRNA干擾組T細(xì)胞中幾乎檢測(cè)不到Lck蛋白的表達(dá)，且其細(xì)胞上清液中IL-4、IL-13的水平（10．19±1．66、12．34±0．79）較非siRNA干擾組（28．06±2．88、27．87±1．61）及對(duì)照組（22．07±2．51、20．47±2．37）明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〈0．01）。結(jié)論特定的21—23bp的RN段能夠以siRNA干擾的方式有效的抑制特定基因的表達(dá)，Lck特異性siRNA可以阻斷哮喘小鼠T細(xì)胞的激活和分化，減少哮喘炎癥因子的釋放。
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