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RNA干擾PDGF-B基因對膠質瘤U251細胞凋亡和增殖的影響
關鍵詞：u251膠質瘤細胞 血小板源生長因子 rna干擾
摘要：目的利用RNA干擾（RNA interference,RNAi）技術特定沉默膠質瘤U251細胞株的血小板源生長因子-B（PDGF-B）基因,觀察其對U251細胞株細胞凋亡和增殖的影響。方法利用脂質體將針對PDGF-B基因的siRNA轉染進入U251細胞,利用實時熒光定量多聚核苷酸鏈式反應（RTPCR）檢測PDGF-B基因表達;Western blot檢測顯示siRNA轉染組PDGF-B蛋白表達,采用MTT法檢測膠質瘤U251細胞的增殖,應用流式細胞計數(shù)觀察抑制PDGF-B基因后膠質瘤U251細胞的凋亡情況。結果 RT-PCR檢測PDGF-B基因表達明顯下降;Western blot檢測顯示siRNA轉染組PDGF-B蛋白表達明顯抑制（抑制率〉60%）,MTT結果顯示siRNA轉染組U251細胞增殖較對照組明顯降低;流式細胞學檢測提示降低PDGF-B在膠質瘤細胞的表達能抑制膠質瘤細胞的有絲分裂,促進細胞的凋亡。結論構建針對膠質瘤細胞PDGF-B的RNA干擾質粒并轉染人膠質瘤U251細胞株后,可明顯抑制U251細胞株PDGF的表達,對人膠質瘤U251細胞株有明顯的生長抑制和促進凋亡作用。
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