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胰島素促進結腸平滑肌細胞合成干細胞因子的信號轉導途徑
關鍵詞：胰島素 結腸 肌 平滑 干細胞因子
摘要：目的探討胰島素（Ins）促進結腸平滑肌細胞（SMC）表達干細胞因子（SCF）的細胞內信號傳導途徑。方法分離培養(yǎng)SD大鼠結腸SMC，采用a-actin免疫熒光鑒定。分3大組進行實驗。①Ins濃度梯度組：SMC添加不同濃度Ins（0、2．5、5、20、40和80mg／L），培養(yǎng)16h。②Ins時間梯度組：SMC＋Ins（40mg／L），分別培養(yǎng)0、8、16和24h。③信號通路阻斷組：SMC加LY-294002或PD-98059預處理后，再予以40mg／L的Ins誘導16h。四甲基偶氮唑鹽（MTT）法檢測結腸SMC增殖情況，Western印跡和反轉錄PCR檢測SCF的變化。結果①Ins在5mg／L濃度即能顯著促進SMC增殖，其效應與20、40和80mg／L時差異無統(tǒng)計學意義（P值均d0．05）。②與未添加Ins組（即空白對照組）比較，低中劑量Ins（2．5、5和20mg／L）即有促進結腸SMC表達SCFmRNA和SCF蛋白的作用（P〈0．05），這種作用在Ins40mg／L時達到最大（P〈0．05），80mg／L時與40mg／L時差異無統(tǒng)計學意義（P〉0．05）。③與0h時相比，40mg／L的Ins作用于SMC8h后SCF表達增加（P〈0．05），16h后達峰值（P〈0．05），24h與16h差異無統(tǒng)計學意義（P〉0．05）。④與空白對照組和溶劑對照組相比，LY-294002、PD-98059處理16h，均能減少Ins誘導的SCF的表達（P值均〈0．05）。結論Ins能促進SMC增殖；在一定范圍內呈劑量與時間依賴性誘導結腸SMC合成SCF，該效應可能與PI3K與MAPK兩條信號通路有關。
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